ELISA试剂盒选购时不能说的秘密

上海一研生物科技有限公司

2015/02/28 09:16

ELISA试剂盒选购时不能说的秘密

1. ELISA试剂盒最新检测方法
酶可以结合在一抗上，也可以结合在二抗上，还可以使用链霉亲和素标记的酶与亲和素标记的一抗结合。
此外ELISA的结果检测还包括放射性检测、荧光检测、化学发光或显色法检测等。
如今检测ELISA有许多途径，我们可以根据自己的偏好进行选择。
一般ELISA检测的是酶促反应的可溶性产物，抗体上结合有相应的酶（例如通常使用的辣根过氧化物酶HRP），而反应体系中添加有相应的底物（如3，3-二氨基联苯胺DAB）。
这种酶促反应生成具有特征性的颜色，可以通过分光光度计进行检测，碱性磷酸酶AP也是一种常用酶。

2. 分析抗体最新类型
单克隆抗体和多克隆抗体都能够用于ELISA试剂盒，实际上有时候二者结合效果更好。例如，对于双抗夹心法而言，用多抗进行捕获而单抗进行检测有时更有帮助。
多抗能够确保捕获所有抗原，随后单抗再特异性检测拥有特定抗原表位的抗原。
3. 交叉产生的反应
如果抗体间发生冲突或交叉反应就会影响整个实验的特异性。其中抗体来源所带来的兼容性就是交叉反应的一个因素。
尽管现在购买源自指定动物的抗体越来越容易，我们仍有必要确认一下是否会产生交叉反应的问题。ELISA试剂盒在用双抗夹心法进行ELISA检测时，检测用的二抗必须特异性针对检测一抗，而不能与捕获抗体起反应。
如果检测用二抗与捕获抗体结合，实验特异性就会大打折扣。通常我们选用源自不同宿主的捕获抗体和检测一抗，来避免上述问题。
4、试剂盒的实验类型
ELISPOT有点像蛋白印迹Western blot，先在带膜的微孔板中培养细胞，然后在膜上检测细胞分泌的抗原形成斑点。此外，我们还需要根据自身需要选择96孔板或是384孔板进行ELISA实验。

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