1、确定抗体的用途
新开展一个研究项目,弄清楚所感兴趣的蛋白的一些基本特性是很有必要的,特别是如果知道蛋白的结构会对选择抗体易于接触和识别的识别区域有很大的帮助。然而,在没有这样精确的结构信息(多数是这种情况)的情况下,ELISA试剂盒了解研究的用途会影响多肽设计的策略。例如:如果研究重点是集中在蛋白的不同区域,如C端或N端,或在一种特定状态下的蛋白,如磷酸化等,那么按照所需序列设计的多肽和产生的相应的抗体在应用上应该没有太大的困难,然而,蛋白的构象将影响抗体与其识别区域之间的相互作用。这种情况下可能存在的问题是如果在折叠的蛋白中,该识别区域被藏在蛋白的内部,抗体将无法接触到该区域。(无法产生相互作用)。
2、识别区域的选择原则
一般说来最理想的抗原性识别区域应具备亲水、位于蛋白表面和结构上易变形性等特点。因为在大多数的天然环境中,亲水区域倾向于集中在蛋白表面,而疏水区域常常被包裹在蛋白内部,同样道理,抗体只能与在蛋白表面发现的识别区域相互作用,而当这些识别区域有足够的结构易变形性而转移到抗体可接触的位置时,将会与抗体间有很高的亲和性。
3、连续的与不连续的识别区域
连续的区域是指由连续的氨基酸序列构成的识别区域。大多数抗体是针对连续识别区域的,抗体能与这类区域以很高的亲和力相结合表明这段序列不在蛋白内部。不连续的识别区域是代表有一定折叠的一段多肽序列,或是将两段分离开的多肽连在一起的抗体的识别区域。在某些情况下,ELISA试剂盒针对这样不连续识别区域的抗体也能产生,只是用来免疫的抗原多肽必须具备与该不连续识别区域相似的二级结构,而序列的长度需要符合相关的要求。
4、基本建议
为了避免识别区域隐藏在蛋白内部的风险,我们通常建议选择蛋白的N,C两端来产生的相应的抗体。因为在完整的蛋白中,N,C两端通常是暴露在蛋白表面的。然而,一定要注意膜蛋白的C端疏水性太强,不适合作为抗原。
20mg 金石蚕苷 含量测定 111812-201001
20mg 川续断皂苷乙 含量测定 111813-201001
20mg 灰毡毛忍冬皂苷乙 含量测定 111814-201001
20mg 柳穿鱼黄素 供鉴别用 111815-201001
20mg 花旗松素 供含量测定 111816-201001
20mg 苦蒿素 供含量测定 111817-201001
20mg 人参皂苷Rd 供含量测定 111818-201001
ELISA试剂盒20mg 羌活醇 含量测定 111820-201001
20mg 紫花前胡苷 供鉴别用 111821-201001
20mg 广藿香酮 鉴别 111822-201001
20mg 欧当归内酯A 供鉴别 111826-201001
20mg 京尼平苷酸 供含量测定用 111828-201001
20mg 乔松素 供含量测定用 111829-201001
20mg 桤木酮 含量测定 111830-201001
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ELISA试剂盒实验前应严格要求
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