供货周期: | 现货 |
品牌: | IBL-America |
规格: | 96T/48T |
货号: | xyH839Ra |
CAS号: |
大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)ELISA试剂盒仅供研究使用
检测范围1μg/L-60μg/L
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)含量。
实验原理
大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)水平。用纯化的大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1),再与HRP标记的大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)浓度。
试剂盒组成
1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 6ml×1瓶 |
2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品(240 ng/L) 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 |
4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 1份 |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 2张 |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
60μg/L | 5号标准品 | 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 |
30μg/L | 4号标准品 | 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 |
15μg/L | 3号标准品 | 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 |
7.5μg/L | 2号标准品 | 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 |
3.75μg/L | 1号标准品 | 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 |
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)ELISA试剂盒坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.大鼠异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)ELISA试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
CEA802Ca 狗胆囊收缩素(CCK)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cholecystokinin (CCK)
xyA399Ca 狗高迁移率族蛋白1(HMG1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for High Mobility Group Protein 1 (HMG1)
xyA102Cp 羊基质金属蛋白酶7(MMP7)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7)
Caprine (Goat)
xyA108Cp 羊骨保护素(OPG)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Osteoprotegerin (OPG)
xyC011Cp 羊补体因子B(CFB)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Complement Factor B (CFB)
xyA073Cp 羊白介素2(IL2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2)
xyA120Cp 羊干细胞因子(SCF)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF)
xyA123Cp 羊转化生长因子α(TGFα)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transforming Growth Factor Alpha (TGFa)
Caprine (Goat)
xyA051Cp 羊胰岛素样生长因子2(IGF2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2)
Caprine (Goat)
xyA052Cp 羊胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1
(IGFBP1) Capra hircus; Caprine (Goat)
xyA129Cp 羊组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3
(TIMP3) Capra hircus; Caprine (Goat)
xyA214Cp 羊窖蛋白(CAV1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1)
xyB949Cp 羊转化生长因子β3(TGFβ3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3)
hircus; Caprine (Goat)
xyA133Cp 羊肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa)
Caprine (Goat)
xyA054Cp 羊胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3
(IGFBP3) Capra hircus; Caprine (Goat)
xyA055Cp 羊胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4
(IGFBP4) Capra hircus; Caprine (Goat)
xyA056Cp 羊白介素10(IL10)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10)
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