大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)ELISA试剂盒

大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)ELISA试剂盒仅供研究使用

检测范围1μg/L-60μg/L

使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)含量。

实验原理

大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)水平。用纯化的大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)，再与HRP标记的大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)浓度。

试剂盒组成

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1.         标准品的稀释：提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.         加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.         温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  

4.         配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5.         洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.         加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.         温育：操作同3。

8.         洗涤：操作同5。

9.         显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

10.     终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.     测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

计算大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)ELISA试剂盒

  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1．从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．  请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1．大鼠70kDa热休克蛋白8(HSPA8)ELISA试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月

xyA133Eq 马肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) 

caballus; Equine (Horse)

xyA054Eq 马胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3 

(IGFBP3) Equus caballus; Equine (Horse)

xyA054Fi 斑马鱼胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding 

Protein 3 (IGFBP3) Danio rerio (Zebrafish)

xyA216Eq 马单核细胞趋化蛋白4(MCP4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 4 (MCP4) 

caballus; Equine (Horse)

xyA056Eq 马白介素10(IL10)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10) 

xyA058Eq 马白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B) 

xyA058Fi 斑马鱼白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B) 

xyA059Eq 马白介素12A(IL12A)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 12A (IL12A) 

xyA060Eq 马白介素13(IL13)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 13 (IL13) 

xyA061Fi 斑马鱼白介素15(IL15)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 15 (IL15) 

xyA153Eq 马甲胎蛋白(αFP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 

xyA007Eq 马血管生长素(ANG)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Angiogenin (ANG) 

xyA063Eq 马白介素17(IL17)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 17 (IL17) 

xyA220Eq 马肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM) 

xyA223Eq 马白介素1受体拮抗剂(IL1RA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) 

caballus; Equine (Horse)

xyA222Eq 马干扰素β(IFNβ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb) 

xyA064Eq 马白介素18(IL18)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18) 

xyA225Eq 马心钠肽(ANP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 

(Horse)

xyA164Eq 马泛素(Ub)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 

xyA071Eq 马白介素1α(IL1α)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 1 Alpha (IL1a) 

(Horse)

xyA072Eq 马防御素β2(DEFβ2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Defensin Beta 2 (DEFb2) 

xyA073Eq 马白介素2(IL2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2) 

xyA196Fi 斑马鱼半乳糖苷酶β(GLβ)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Galactosidase Beta (GLb) 

xyA077Eq 马白介素4(IL4)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 4 (IL4) 

xyA078Eq 马白介素5(IL5)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 5 (IL5) 

xyA079Eq 马白介素6(IL6)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6) 

xyA080Eq 马白介素8(IL8)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8) 

xyA084Eq 马瘦素(LEP)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Leptin (LEP) 

xyA088Eq 马单核细胞趋化蛋白2(MCP2)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 2 (MCP2) 

caballus; Equine (Horse)