供货周期: | 现货 |
品牌: | QIAGEN |
规格: | 50T/100T |
货号: | ZS301 |
CAS号: |
DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶蛋白标准(5mg/ml BSA)
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。蛋白标准(5mg/ml BSA)
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
蛋白标准(5mg/ml BSA)相关产品系列表:
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(GP1Ba)
xyM427Hu 人Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1
蛋白标准(5mg/ml BSA)
(Rac1)
xyE320Hu 人Ras同源基因家族成员A(RHOA)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Ras Homolog Gene Family, Member A (RHOA)
xyE614Hu 人细胞分裂周期因子42(CDC42)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cell Division Cycle Protein 42 (CDC42)
xyH911Hu 人肝细胞生长因子激活因子(HGFAC)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor Activator (HGFAC)
xyE879Hu 人分拣连接蛋白9(SNX9)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Sorting Nexin 9 (SNX9)
xyD762Hu 人犬尿氨酸酶(KYNU)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Kynureninase (KYNU)
xyD863Hu 人半胱氨酸共轭β裂解酶(CCβL1)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Cysteine Conjugate Beta Lyase, Cytoplasmic
(CCbL1)
xyE260Hu 人色氨酸-2,3-双加氧酶(TDO)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Tryptophan-2,3-dioxygenase (TDO)
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xyA873Hu 人热休克蛋白70(HSP70)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Heat Shock Protein 70 (HSP70)
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xyC214Hu 人丝蛋白Aα(FLNα)ELISA试剂盒96t/48t ELISA Kit for Filamin A Alpha (FLNa)
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