供货周期: | 现货 |
品牌: | QIAGEN |
规格: | 50T/100T |
货号: | D6922-01 |
CAS号: |
DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。 DNA 分子在高于等电点的 pH 溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖 - 磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链 DNA 几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极移动。
制备琼脂糖凝胶Plasmid Maxi Kit(5)
1 .称 1. 2g 琼脂糖,加 100ml 电泳缓冲液( 1×TAE )加热熔化,取出摇匀,即为 1. 2% 的凝胶。
2. 当胶液冷至 60℃ 时,加 EB10μl ,小心混匀,缓慢倒入制胶模具中,在胶一端插上梳子。
3 .待胶凝固后,拨出梳子,将模具置于电泳槽中,加入 1×TAE ,让液面高于胶面 2 -3mm 。
4 .取 4ul 质粒,加 2ul lodaing buffer , 6ulddH 2 O ,混匀,用加样器吸取样品。加入点样孔中,注意加样器吸头应恰好置于凝胶点样孔中,不可刺穿凝胶,也要防止将样品溢出孔外。
5 .接通电源, 1-5V/cm 电压,开始电泳。Plasmid Maxi Kit(5)
6 .当溴酚兰染料移动到距离胶前沿 1 -50px 处,停止电泳。
7. 切断电源后,取出凝胶,在紫外灯( 360nm 、 312nm 或 254nm )下或经凝胶成像系统观察或拍照。
碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒 DNA 与线性染色体 DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。在 pH 值介于 12. 0-12. 5 这个狭窄的范围内,线性的 DNA 双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒 DNA 的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入 Ph4. 8 的乙酸钾高盐缓冲液恢复 pH 至中性时,共价闭合环状的质粒 DNA 的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体 DNA 的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕成网状结构,通过离心,染色体 DNA 与不稳定的大分子 RNA 、蛋白质 -SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去。
Plasmid Maxi Kit(5)相关产品系列表:
xyA928Ra大鼠肿瘤蛋白p53(TP53)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Tumor Protein p53 (TP53)
CEA393Ra大鼠P物质(SP)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Substance P (SP)
xyA160Ra大鼠α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI)
xyA588Ra大鼠M2-型丙酮酸激酶(PKM2)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Pyruvate Kinase, Muscle (PKM2)
xyA820Ra大鼠凝血因子Ⅱ(F2)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Coagulation Factor II (F2)
xyA033Ra大鼠干扰素α(IFNα)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Interferon Alpha (IFNa)
xyA181Ra大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Elastase 2, Neutrophil (ELA2)
xyA625Ra大鼠趋化因子C-X-C-基元受体3(CXCR3)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Receptor 3 (CXCR3)
xyA778Ra大鼠B-细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2)
xyA626Ra大鼠胱天蛋白酶3(CASP3)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Caspase 3 (CASP3)Plasmid Maxi Kit(5)
xyA627Ra大鼠胱天蛋白酶9(CASP9)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Caspase 9 (CASP9)
xyA896Ra大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Cystatin 3 (CST3)
xyA899Ra大鼠骨桥素(OPN)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Osteopontin (OPN)
CEA898Ra大鼠α-骨胶原交联(αCTx)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Alpha-Crosslaps (aCTx)
CEA892Ra大鼠β-骨胶原交联(βCTx)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Beta-Crosslaps (bCTx)
xyA589Ra大鼠血红素氧合酶2(HO2)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Heme Oxygenase 2, Decycling (HO2)
xyA641Ra大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Secretory Immunoglobulin A (sIgA)
xyA478Ra大鼠心肌肌钙蛋白I(TNNI3)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3)
xyA831Ra大鼠凝血酶/抗凝血酶复合体(TAT)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Thrombin/Antithrombin Complex (TAT)
xyA833Ra大鼠血管性血友病因子(vWF)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Von Willebrand Factor (vWF)
xyA834Ra大鼠凝血因子Ⅹ(F10)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Coagulation Factor X (F10)
xyA840Ra大鼠凝血因子Ⅸ(F9)ELISA试剂盒96t/48tELISA Kit for Coagulation Factor IX (F9)
相关产品
小鼠精氨酸加压素受体1B(AVPR1B)检测试剂盒
小鼠心肌肌钙蛋白T(TNNT2)检测试剂盒
小鼠谷氨酰胺酶2(GLS2)检测试剂盒
小鼠谷氨酰胺酶(GLS)检测试剂盒
小鼠胸肾表达趋化因子(BRAK)检测试剂盒
小鼠激肽原1(KNG1)检测试剂盒
小鼠VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)检测试剂盒
小鼠肝配蛋白B2(EFNB2)检测试剂盒
小鼠尿调蛋白(UMOD)检测试剂盒
小鼠胆碱乙酰转移酶(ChAT)检测试剂盒
小鼠脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)检测试剂盒
小鼠YY肽(PYY)检测试剂盒
小鼠N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGα)检测试剂盒
小鼠信号素7A(SEMA7A)检测试剂盒
小鼠CD83分子(CD83)检测试剂盒
详细地址
关注
拨打电话
留言咨询