胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤（TSB-YE）

胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤（TSB-YE）是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期，体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大，胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤（TSB-YE）因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。

首先，我们要从众多培养基成分及影响的环境因素中筛选出具有主效应的因子。这时，通常采用筛选试验。主要有全因子因析设计和Plackett－Burman设计。两种筛选试验，各有千秋，但都能以最少的试验次数筛选出主效应因子。其中全因子设计能够表现出因子的三级以上交互作用，而Plackett－Burman设计由于是两水平设计，所以交互作用只在二级交互作用。另外还有部分因子因析设计。

筛选到了主效应因子，我们就可以开始进行下一步优化试验。此时，主要有中心复合设计和Box-Behnken设计。

中心组合设计是一种国际上较为常用的响应面法，胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤（TSB-YE）是一种5水平的实验设计法。采用该法能够在有限的实验次数下，对影响生物过程的因子及其交互作用进行评价，而且还能对各因子进行优化，以获得影响过程的最佳条件。

Box- Behnken设计是另一种国际上较为常用的响应面法，是一种3水平的实验设计法。同样具有响应面法的优点。近年来利用该法进行生物过程优化的文献比用中心组合设计法的明显地少。

斜面培养基　　

葡萄糖8g，酵母粉10g碳酸钙5g琼脂15~20g水1000mLpH5.5，分装试管。0.IMPa灭菌20min。95％酒精(食用级)40mL。摆斜面，

液体增殖培养基　　

葡萄糖10g 酵母粉10g pH5.5水1000mL灭菌后加入酒精(食用级)40mL 0.1MPa灭菌20min。

醋酸菌种的制备　　

扩大培养过程：安瓿管，液体试管1．液体试管2，100mL三角瓶，500mL三角瓶，1000mL三角瓶，种子罐。

安瓿管开启：酒精棉球擦抹三次，用重器撞击，打开，注入0.5mL无菌水，将菌球溶解，全部注入装有10mL液体培养基的18×180试管1内，30℃培养72h，每2h摇动—次

菌体生长：培养基变混浊后，颜色变浅，胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤（TSB-YE）对光观察摇动时有云雾状金属光泽。每只装有10mL液体培养基的试管2接入lmL或0.5mL菌液，30℃培养48h，每2h摇动—次。

xy1167 氯化钠血琼脂基础 250g 用于副溶血性弧菌的溶血试验（GB标准）

Sodium Chloride Blood Agar Base

xy1168 霍乱双糖铁琼脂（KIA） 250g 用于霍乱弧菌的生化试验（SN标准）

Kligler Iron Agar

xy1169 T1N1琼脂 250g 用于霍乱弧菌的培养（SN标准）

T1N1 Agar

xy1170 T1N0肉汤 250g 用于霍乱弧菌的生长试验（SN标准）

T1N0 Broth

xy1171 T1N3肉汤 250g 用于霍乱弧菌的生长试验（SN标准）

T1N3 Broth

xy1172 精氨酸葡萄糖斜面琼脂 250g 用于霍乱弧菌的复合生化试验（SN标准）

Arginine Dextrose Agar

xy1180 胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤（TSB-YE） 250g 用于单增李氏菌增菌肉汤（EB）的配制（SN，GB，FDA标准）

Trypticase Soy-Yeast Extract Broth

xy1181 胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂（TSA-YE）Trypticase Soy-Yeast Extract Agar 250g 用于单增李氏菌的分纯，培养，可用于做7%羊血琼脂（SN标准）

Trypticase Soy-Yeast Extract Agar

xy1182 李氏菌选择性培养基基础（MMA） 250g 用于单增李氏菌选择性分离（SN标准）

Modified Mcbride Agar Base

xy1183 糖发酵肉汤基础 250g 适用于微生物检验中各种糖发酵实验，无菌加入各种糖醇类物质（SN标准）

Bromcresol Purple Broth Base

xy1184 李氏菌增菌肉汤（LB1，LB2）基础 250g 添加奈啶酮酸，吖啶黄素，即为LB1，LB2，用于李氏菌二步增菌（GB标准）

Listeria Enrichment Broth Base

xy1185 半固体动力培养基 250g 用于动力观察，菌种保存，H抗原位相变异试验等（SN标准）

Motility Test Medium(Semisolid)

xy1186 牛津琼脂（OXA）基础 250g 用于单增李氏菌的选择性分离（SN标准）