供货周期: | 现货 |
品牌: | ATCC |
型号: | 株 |
货号: | xy-1789 |
人胰腺细胞操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,人胰腺细胞此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!
细胞传代培养(消化法)具体操作:
一:传代前准备;
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:人胰腺细胞取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
二:胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2. 人胰腺细胞 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
三:吹打分散细胞;
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。人胰腺细胞传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
XY1068 人肺腺癌细胞,PAa细胞
XY1069 人肺腺癌细胞,NCI-H441 [H441]细胞
XY1070 人肺腺癌细胞,NCI-H292细胞
XY1071 人肺腺癌细胞,NCI-H1975细胞
XY1072 人肺腺癌细胞,NCI-H1395细胞,
XY1073 人肺腺癌细胞,LTPEP-a-2细胞
XY1074 人肺腺癌细胞,Human H1299细胞
XY1075 人肺腺癌细胞,H1299细胞
XY1076 人肺腺癌细胞,GLC-82细胞
XY1077 人肺腺癌细胞,Calu-3细胞
XY1078 人肺腺癌细胞,Calu-1细胞
XY1079 人肺腺癌细胞,A549细胞
XY1080 人肺腺癌细胞,A2细胞
XY1081 人肺腺癌耐顺铂株 A549/DDP细胞
XY1082 人肺腺癌 D6细胞,
XY1083 人肺腺癌 (胸水) Calu-3细胞
XY1084 人肺泡上皮细胞,HPAEpiC细胞
XY1085 人肺鳞癌细胞,SK-MES细胞
XY1086 人肺鳞癌细胞,SK-MES-1细胞,
XY1087 人肺鳞癌细胞,NCI-H520细胞
XY1088 人肺鳞癌细胞,NCI-H520细胞
XY1089 人肺巨细胞癌细胞,HLamp细胞,
XY1090 人肺巨细胞癌细胞,hLAMP细胞
XY1091 人肺巨细胞癌(PG)的高转移亚系 PG-BE1细胞
XY1092 人肺巨细胞癌(PG)的低转移亚系 PG-LH7细胞
XY1093 人肺巨细胞癌 PG细胞
XY1094 人肺动脉内皮细胞,HPAEC细胞
XY1095 人肺成纤维样细胞,HLF细胞
XY1096 人肺成纤维细胞,HFL1细胞
XY1097 人肺扁平上皮癌细胞,QG-56细胞
XY1098 人肺癌亚历山大细胞系 PLC/PRF/5细胞
XY1099 人肺癌细胞株 MSTO-211H细胞
XY1100 人肺癌细胞系(未分化)Calu-6细胞
XY1101 人肺癌细胞系 Tul-1细胞
XY1102 人肺癌细胞(淋巴结转移) NCI-H292细胞
XY1103 人肺癌细胞,PC9细胞
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