供货周期: | 现货 |
品牌: | ATCC |
型号: | 株 |
货号: | xy-1845 |
表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!
细胞传代培养(消化法)具体操作:
一:传代前准备;
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
二:胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2. 表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
三:吹打分散细胞;
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。表达SV40T和EBNA1的人胚肾细胞传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
XY1336 口腔表皮样癌细胞,KB细胞
XY1337 孔雀石绿链霉菌
XY1338 空肠弯曲菌
XY1339 空肠弯曲杆菌
XY1340 克柔念珠菌
XY1341 克柔假丝酵母菌
XY1342 克雷伯肺炎杆菌
XY1343 抗生链霉菌
XY1344 抗辐射链霉菌
XY1345 康宁木霉
XY1346 卡尔斯伯酵母
XY1347 巨噬细胞,Ana-1细胞
XY1348 巨核细胞白血病细胞,Dami细胞
XY1349 巨大芽孢杆菌
XY1350 桔青霉
XY1351 泾阳链霉菌
XY1352 近平滑念珠菌
XY1353 近平滑假丝酵母
XY1354 金黄色葡萄球菌
XY1355 金龟子绿僵菌小孢变种
XY1356 金龟子绿僵菌
XY1357 结直肠癌细胞,LOVE1细胞
XY1358 结肠腺癌细胞,RKO细胞
XY1359 结肠腺癌细胞,LS 174T细胞
XY1360 结肠腺癌细胞,CW-2细胞
XY1361 结肠腺癌细胞,COLO-320细胞
XY1362 结肠腺癌细胞,Caco-2细胞
XY1363 结肠癌细胞,SW620细胞
XY1364 结肠癌细胞,SW480 [SW-480细胞
XY1365 结肠癌细胞,LoVo细胞
XY1366 结肠癌细胞,HT-29细胞
XY1367 结肠癌细胞,HCT 116细胞
XY1368 结肠癌细胞,COLO 205细胞
XY1369 杰丁汉逊酵母
XY1370 胶质母细胞瘤细胞,A172细胞
XY1371 胶质瘤细胞,U251细胞
XY1372 胶质瘤细胞,SHG-44细胞
XY1373 胶质瘤细胞,C6细胞
XY1374 健强地霉
XY1375 菅囊酵母
XY1376 艰难梭菌Clostridium difficile
XY1377 间型酒香酵母
XY1378 假结核耶尔森氏菌
相关产品
小鼠精氨酸加压素受体1B(AVPR1B)检测试剂盒
小鼠心肌肌钙蛋白T(TNNT2)检测试剂盒
小鼠谷氨酰胺酶2(GLS2)检测试剂盒
小鼠谷氨酰胺酶(GLS)检测试剂盒
小鼠胸肾表达趋化因子(BRAK)检测试剂盒
小鼠激肽原1(KNG1)检测试剂盒
小鼠VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)检测试剂盒
小鼠肝配蛋白B2(EFNB2)检测试剂盒
小鼠尿调蛋白(UMOD)检测试剂盒
小鼠胆碱乙酰转移酶(ChAT)检测试剂盒
小鼠脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)检测试剂盒
小鼠YY肽(PYY)检测试剂盒
小鼠N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGα)检测试剂盒
小鼠信号素7A(SEMA7A)检测试剂盒
小鼠CD83分子(CD83)检测试剂盒
详细地址
关注
拨打电话
留言咨询