供货周期: | 现货 |
品牌: | DRG |
规格: | 盒 |
货号: | XY-1021 |
CAS号: |
大鼠腺苷酸环化酶(AC)ELISA 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用 标本:组织匀浆
试验原理:
AC试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知AC浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将AC和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中AC的活性浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
试剂盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48份酶标板 | 1块板(96T) | 半块板(48T) | 即用型 |
塑料膜板盖 | 1块 | 半块 | 即用型 |
标准品:400pg/ml | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按说明书进行稀稀 |
空白对照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
标准品稀释缓冲液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 |
生物素标记的抗AC抗体 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
亲和链酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 |
洗涤缓冲液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 按说明书进行稀释 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
终止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
大鼠腺苷酸环化酶(AC)ELISA 检测试剂盒操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
大鼠腺苷酸环化酶(AC)ELISA 检测试剂盒样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
400pg/ml | (6号标准品) | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 |
200pg/ml | (5号标准品) | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 |
100pg/ml | (4号标准品) | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
50pg/ml | (3号标准品) | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
25pg/ml | (2号标准品) | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
12.5pg/ml | (1号标准品) | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 |
0pg/ml | (空白对照) | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 |
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
大鼠腺苷酸环化酶(AC)ELISA 检测试剂盒操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
建议使用的实验方案
标准品浓度(pg/ml) | ||||||||||||
A | 400 | 400 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
B | 200 | 200 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
C | 100 | 100 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
D | 50 | 50 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
E | 25 | 25 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
F | 12.5 | 12.5 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
G | 0 | 0 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
H | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 |
局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
结果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的AC标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的AC含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-400pg/ml
4、敏感度: 1.0pg/ml
相关产品如下:
xyB517Hu人颗粒溶素(GNLY)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Granulysin (GNLY)
xyB518Hu人白介素1受体关联激酶4(IRAK4)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Interleukin 1 ReHZptor Associated Kinase 4 (IRAK4)
xyB520Hu人白介素1受体关联激酶3(IRAK3)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Interleukin 1 ReHZptor Associated Kinase 3 (IRAK3)
xyB521Hu人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Mucosal Addressin HZll Adhesion Molecule 1 (MAdCAM1)
xyB522Hu人肺部激活调节趋化因子(PARC)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Pulmonary Activation Regulated Chemokine (PARC)
xyB532Hu人维甲酸诱导基因1蛋白(RIG1)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Retinoic Acid Inducible Gene 1 Protein (RIG1)
xyB537Hu人丝氨酸蛋白酶2(PRSS2)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Protease, Serine 2 (PRSS2)
xyB539Hu人血清淀粉样P物质(SAP)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Serum Amyloid P Component (SAP)
xyB542Hu人甘露糖受体C1(MRC1)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Mannose ReHZptor C Type 1 (MRC1)
xyB547Hu人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO)
xyB559Hu人丝切蛋白1(CFL1)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Cofilin 1, Non Muscle (CFL1)
xyB560Hu人淋巴毒素β(LTβ)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Lymphotoxin Beta (LTb)
xyB564Hu人干扰素调节因子1(IRF1)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 1 (IRF1)
xyB568Hu人血小板因子4V1(PF4V1)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Platelet Factor 4 Variant 1 (PF4V1)
xyB570Hu人粒细胞趋化蛋白2(GCP2)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Granulocyte Chemotactic Protein 2 (GCP2)
xyB578Hu人IgG-Fc片段受体Ⅰ(FcγRⅠ)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for ReHZptor I For The Fc Region Of Immunoglobulin G (FcgRI)
xyB579Hu人IgG-Fc片段受体Ⅱ(FcγRⅡ)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for ReHZptor II For The Fc Region Of Immunoglobulin G (FcgRII)
xyB582Hu人IgE-Fc片段受体Ⅱ(FcεRⅡ)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for ReHZptor II For The Fc Region Of Immunoglobulin E (FHZRII)
xyB584Hu人单核细胞巨噬细胞分化关联蛋白(MMA)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Monocyte To Macrophage Differentiation Associated Protein (MMA)
xyB585Hu人磷脂酰肌醇蛋白聚糖2(GPC2)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Glypican 2 (GPC2)
xyB589Hu人干扰素调节因子3(IRF3)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 3 (IRF3)
xyB590Hu人含钯蛋白(PALLD)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Palladin (PALLD)
xyB592Hu人胱天蛋白酶1(CASP1)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Caspase 1 (CASP1)
xyB595Hu人酪氨酸激酶2(Tyk2)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Tyrosine Kinase 2 (Tyk2)
xyB598Hu人干扰素调节因子5(IRF5)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 5 (IRF5)
xyB601Hu人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC1)ELISA试剂盒原理ELISA Kit for B-Lymphocyte Chemoattractant 1 (BLC1)
相关产品
小鼠精氨酸加压素受体1B(AVPR1B)检测试剂盒
小鼠心肌肌钙蛋白T(TNNT2)检测试剂盒
小鼠谷氨酰胺酶2(GLS2)检测试剂盒
小鼠谷氨酰胺酶(GLS)检测试剂盒
小鼠胸肾表达趋化因子(BRAK)检测试剂盒
小鼠激肽原1(KNG1)检测试剂盒
小鼠VGF神经生长因子诱导蛋白(VGF)检测试剂盒
小鼠肝配蛋白B2(EFNB2)检测试剂盒
小鼠尿调蛋白(UMOD)检测试剂盒
小鼠胆碱乙酰转移酶(ChAT)检测试剂盒
小鼠脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)检测试剂盒
小鼠YY肽(PYY)检测试剂盒
小鼠N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGα)检测试剂盒
小鼠信号素7A(SEMA7A)检测试剂盒
小鼠CD83分子(CD83)检测试剂盒
详细地址
关注
拨打电话
留言咨询