供货周期: | 现货 |
品牌: | ATCC |
规格: | 株 |
货号: | xy-2006 |
CAS号: |
绿猴肾细胞操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,绿猴肾细胞此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!
细胞传代培养(消化法)具体操作:
一:传代前准备;
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:绿猴肾细胞取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
二:胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2. 绿猴肾细胞 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
三:吹打分散细胞;
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。绿猴肾细胞传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
New B? n'?`>?,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。转入Tet-off调控,含EGFP基因的CHO细胞传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
XY1581 大鼠肾小管上皮细胞,ATCC:CRL-6509 NRK细胞
XY1582 大鼠肾细胞,NRK细胞
XY1583 大鼠肾细胞,NRK-52E细胞
XY1584 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化) PC-12细胞
XY1585 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞,PC12细胞
XY1586 大鼠肾成纤微细胞,NRK-49F细胞
XY1587 大鼠神经胶质瘤细胞,C6细胞
XY1588 大鼠乳腺腺癌细胞系 MADB106细胞
XY1589 大鼠乳腺癌细胞,SHZ-88细胞,
XY1590 大鼠乳腺癌细胞,MADB-106细胞
XY1591 大鼠肉瘤细胞,WK256细胞
XY1592 大鼠气管上皮细胞,RTE细胞
XY1593 大鼠皮层神经元细胞,RN-c细胞
XY1594 大鼠脑膜细胞,RMC细胞
XY1595 大鼠脑胶质瘤细胞,F98-RFP-puro细胞
XY1596 大鼠脑胶质瘤细胞,C6细胞,
XY1597 大鼠脑胶质瘤细胞,C6-RFP细胞
XY1598 大鼠脑胶质瘤细胞,C6-EGFP-puro细胞
XY1599 大鼠脑间质细胞,DI TNC1细胞
XY1600 大鼠卵巢癌细胞株 NUTU-19细胞
XY1601 大鼠巨噬细胞,MC细胞
XY1602 大鼠胶质瘤细胞,C6细胞
XY1603 大鼠回肠细胞,IEC-18细胞,
XY1604 大鼠滑膜细胞
XY1605 大鼠骨髓瘤细胞IR983F细胞
XY1606 大鼠骨髓瘤细胞,Y3-Ag1.2.3细胞
XY1607 大鼠骨肉瘤细胞,UMR-106细胞,
XY1608 大鼠骨肉瘤 VMR106细胞
XY1609 大鼠骨骼肌成肌细胞,L6细胞
XY1610 大鼠肝星形细胞,HSC-T6细胞,
XY1611 大鼠肝星形细胞,CFSC-8B细胞
XY1612 大鼠肝星形细胞,CFSC-3H & 5H细胞
XY1613 大鼠肝星形细胞,CFSC-2G细胞
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