供货周期: | 现货 |
品牌: | ATCC |
规格: | 株 |
货号: | xy-2019 |
CAS号: |
大鼠肾成纤微细胞操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,大鼠肾成纤微细胞此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!
细胞传代培养(消化法)具体操作:
一:传代前准备;
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:大鼠肾成纤微细胞取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
二:胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2. 大鼠肾成纤微细胞 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
三:吹打分散细胞;
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。大鼠肾成纤微细胞传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
XY0196 小鼠淋巴瘤细胞,EL4.IL-2细胞
XY0197 小鼠淋巴结血管上皮样细胞,SVEC4-10细胞
XY0198 小鼠巨噬细胞,ANA-1细胞,
XY0199 小鼠精母细胞
XY0200 小鼠结肠腺癌细胞,CT-26细胞,
XY0201 小鼠结肠癌细胞,CT26.WT细胞,
XY0202 小鼠结肠癌细胞,CMT93细胞
XY0203 小鼠结肠癌 C26细胞,
XY0204 小鼠浆细胞瘤 MPC-11细胞
XY0205 小鼠间充质干细胞系 C3H10细胞
XY0206 小鼠畸胎瘤细胞,P19细胞,
XY0207 小鼠畸胎瘤细胞,F9细胞
XY0208 小鼠红白血病细胞,MEL细胞
XY0209 小鼠黑色素瘤细胞,B16细胞,
XY0210 小鼠黑色素瘤细胞,B16F1细胞
XY0211 小鼠黑色素瘤细胞,B16-F0-EGFP细胞
XY0212 小鼠黑色素瘤细胞,B16BL6细胞
XY0213 小鼠黑色素瘤高转移细胞,B16F10细胞
XY0214 小鼠黑色瘤细胞,B16细胞
XY0215 小鼠骨髓细胞,FDC-P1细胞
XY0216 小鼠骨髓瘤细胞,SP2/0细胞
XY0217 小鼠骨髓瘤细胞,Sp2/0-Ag14细胞
XY0218 小鼠骨髓瘤细胞,P3X63Ag8细胞
XY0219 小鼠骨髓瘤细胞,P3-X63-Ag8.653细胞
XY0220 小鼠骨髓瘤细胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]细胞
XY0221 小鼠骨髓瘤细胞,NS1细胞
XY0222 小鼠骨髓瘤细胞,FO细胞
XY0223 小鼠骨髓瘤细胞,Fox-NY细胞
XY0224 小鼠骨髓瘤细胞
XY0225 小鼠骨髓瘤B淋巴细胞,SP2/MIL-6细胞
XY0226 小鼠骨髓基质细胞,P9细胞
XY0227 小鼠骨髓基质细胞,P9-EGFP-puro细胞
XY0228 小鼠骨髓基质细胞,OP9细胞
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