供货周期: | 现货 |
品牌: | ATCC |
规格: | 株 |
货号: | xy-2196 |
CAS号: |
赭绿青霉操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,赭绿青霉此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!
细胞传代培养(消化法)具体操作:
一:传代前准备;
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:赭绿青霉取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
二:胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2. 赭绿青霉 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
三:吹打分散细胞;
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。赭绿青霉传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
XY1620 大鼠肝上皮样干细胞,WB-F344细胞
XY1621 大鼠肝癌细胞(乳腺癌细胞接种到肝脏成瘤) Walker-256细胞
XY1622 大鼠肝癌细胞(wistar 大鼠) CBRH7919细胞
XY1623 大鼠肝癌细胞,Walker-256细胞,
XY1624 大鼠肝癌细胞,RH-35细胞
XY1625 大鼠肝癌细胞,H4-II-E-C3细胞
XY1626 大鼠肝癌细胞,H4-ⅡE细胞
XY1627 大鼠肝癌细胞,CRL-1548细胞
XY1628 大鼠肝癌细胞,CBRH-7919细胞
XY1629 大鼠肝癌 R15细胞,
XY1630 大鼠肺上皮Ⅱ型细胞,RLE-6TN细胞
XY1631 大鼠肺泡巨噬细胞,NR8383细胞
XY1632 大鼠埀体瘤细胞,GH3细胞
XY1633 大鼠垂体细胞,RPC细胞
XY1634 大鼠垂体瘤细胞,MMQ细胞
XY1635 大鼠垂体瘤细胞,GH3细胞
XY1636 大鼠成纤维细胞,208F细胞
XY1637 大鼠成肌细胞(分化)\L6细胞
XY1638 大鼠成肌细胞,L6细胞,
XY1639 大鼠成骨细胞,ROS1728细胞
XY1640 大鼠鼻咽癌细胞,FAT细胞
XY1641 大丽花轮枝孢
XY1642 大黄鱼肾细胞,PCK细胞
XY1643 大黄鱼EPC细胞,EPC细胞
XY1644 大肠杆菌
XY1645 大肠埃希氏菌O157:H7
XY1646 大肠埃希氏菌(大肠杆菌)
XY1647 大肠埃希氏菌
XY1648 大肠埃氏菌
XY1649 大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种
XY1650 痤疮丙酸杆菌
XY1651 脆弱拟杆菌
XY1652 刺孢吸水链霉菌昆明变种
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