供货周期: | 现货 |
品牌: | ATCC |
规格: | 株 |
货号: | xy-2200 |
CAS号: |
枯草芽孢杆菌操作前打开紫外灯30-60分钟,这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果,但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置,可以与紫外灯一起打开,枯草芽孢杆菌此时不需要抽滤开的过大就可以。(所谓的抽滤装置就是就是那个风机,就是吹风超净工作台,不是过滤培养液的)!
细胞传代培养(消化法)具体操作:
一:传代前准备;
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:枯草芽孢杆菌取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
二:胰蛋白酶消化;
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2. 枯草芽孢杆菌 显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
三:吹打分散细胞;
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
四:分装稀释细胞;
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
五:继续培养;
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。枯草芽孢杆菌传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
XY1753 EB病毒转化的绒猴淋巴细胞,B95-8细胞
XY1754 EBV 转化的绒猴白细胞,B95-8细胞
XY1755 EB 病毒转化的B 细胞,CGM1细胞
XY1756 CCL13张氏肝细胞正常 Chang liver细胞
XY1757 C57小鼠黑色素瘤瘤株 ME细胞
XY1758 C3H小鼠骨肉瘤 LM8细胞
XY1759 B淋巴细胞, WEHI 22.1细胞
XY1760 Burkitt's 淋巴瘤细胞,Raji细胞
XY1761 Burkitt's 淋巴瘤细胞,NAMALWA细胞
XY1762 BALB/C小鼠胚成纤维细胞,BALB/3T3细胞
XY1763 BALB/C小鼠肝上皮细胞,BNL1ME A.7R.1细胞
XY1764 BALB/c小鼠ES细胞,B/c-ES细胞
XY1765 Asp2人胚胎肾细胞转化细胞,FC33细胞
XY1766 Ad5DNA转化的胚肾 HEK-293细胞
XY1767 615小鼠网织细胞性白血病瘤株 L615细胞
XY1768 615小鼠乳腺癌瘤株 Ca763细胞
XY1769 615小鼠乳腺癌瘤株 Ca761细胞
XY1770 615小鼠乳腺癌瘤株 Ca759细胞
XY1771 615小鼠乳头状肺腺癌瘤株 P615细胞
XY1772 615小鼠前胃癌瘤株 Fc细胞
XY1773 615小鼠滑膜肉瘤瘤株 ZM755细胞
XY1774 615小鼠肺癌瘤株
XY1775 615小鼠T细胞性白血病瘤株 L7912细胞
XY1776 5-8转基因鼻咽癌细胞系 F2-2细胞
XY1777 293T/17人胚肾细胞,293T/17细胞
XY1778 1肝细胞
XY1779 129小鼠ES细胞,E14细胞
XY1780 129小鼠ES细胞,D3细胞
XY1781 (舌鳞癌细胞,Tca-8113细胞
XY1782 (卵巢癌细胞,HO-8910细胞
XY1783 (急性粒细胞白血病细胞) HL-60?细胞
XY1784 (肝癌细胞,SK-HEP-1细胞
XY1785 (膀胱鳞癌细胞,SCaBER细胞
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