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CAS号: | CAS:9012-90-2,T4 DNA |
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英文名称:T4 DNA Polymerase
CAS号:9012-90-2
分子量:104kDa,单体
级别:BR
来源:含有T4噬菌体克隆基因43的大肠杆菌
浓度:5~10u/ul
活性定义:是指在37℃、30分钟内将10nmol脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
酶活性分析混合物:67mM Tris-HCL(PH8.8), 1mM DTT, 6.7mM MgCL2, 16.7mM (NH4)2SO4, 0.2mg/ml BSA, 0.033mM各种dNTP,dGTP, 0.4MBq/ML(3H).-dTTP和0.2mM热变性和核酸酶处理的牛胸腺DNA
保存缓冲液组分:20mM 磷酸钾(PH7.5), 200mM KC1, 20mM DTT和50%(v/v)甘油
5×反应缓冲液:335mM Tris-HCL(PH8.8,25℃), 33mM MgCL2, 5mM DTT, 84mM (NH4)2SO4
抑制剂:金属螯合剂,核苷酸类似物2(p-n-butylanilino)-dATP、N2-(p-n-burylanilino)-dGTP、SH-封闭混合物
失活:75℃加热10分钟
质量控制:测试表明无内切脱氧核糖核酸酶污染
性状:悬浮液。重组酶,在模板及引物存在的条件下,T4 DNA聚合酶催化沿5'→3'方向DNA的合成。本酶还具有3'→5'外切核酸酶的活性,该活性比DNA聚合酶I强。T4 DNA聚合酶不像大肠杆菌DNA 聚合酶 I,不具有5'→3' 外切核酸酶的活性。
用途:生化研究。3'突出末端平滑化;5'突出末端补平;单链删除后亚克隆;基因定位突变中的第二条链的合成;通过置换合成法(replacement synthesis)对DNA探针进行标记。
保存:-20℃
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