植物β-葡萄糖苷酸酶(GUS)ELISA检测试剂盒说明书

2015-05-13 09:44  下载量:1

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操作注意事项 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 所有液体组分使用前充分摇匀。操作步骤 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL; 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL; 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体50μL,,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

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