人(human)内皮素-1(ET-1) 的说明书

2015-08-12 07:10  下载量:0

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一、试 剂 组 成 精密度微孔板96孔 (Microtitration Strips) 1块 2~8℃干燥保存 酶标偶合液 (Conjugate ) 1瓶 12.0毫升 2~8℃冷藏保存 标准品 (Standard) 5瓶 各1.0毫升 2~8℃冷藏保存 呈色剂A (Substrate A) 1瓶 6.0毫升 2~8℃避光冷藏保存 呈色剂B (Substrate B) 1瓶 6.0毫升 2~8℃避光冷藏保存 终止液 (Stopping Solution) 1瓶 6.0毫升 室温保存 20倍浓缩洗涤液 (Rinsing Buffer x 20) 1瓶 60.0毫升 2~8℃冷藏保存 5倍浓缩样品稀释液 (Diluent x 5) 1瓶 15.0ml 2~8℃冷藏保存 英文说明书,中文说明书 各一份 室温保存 二、注意事项 1. 此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。 2.使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟, 3.浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。 4.浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟 5.若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。 6.在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低精确度,造成吸光度偏离的假像。 7.加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。 8.试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。 三、实验前准备 1.使用前应将盒内各试剂取出,室温放置至少30分钟。 2.准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等 3.浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液 4.浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液 5.用应用样品稀释液来稀释样品,按照1:100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中,充分混匀待用。) 四、操 作 步 骤 1.取出酶标板,设空白孔,依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中(空白孔视为0号标准品,用医用蒸馏水替代) 2、分别标记样品编号,加入100μl的稀释样品于空白微孔中(不同的样本采用不同的吸头)。 3、将酶标板置于37℃温育30分钟; 4、将酶标板板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体; 5、每个孔中加满应用洗涤液后,轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。 6、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。 7、在标准品孔和样品孔中加入100μl的酶标偶合溶液。 8、将96孔板置于37℃温育30分钟。 9、将酶标板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体。 10、每个孔中再次加满洗涤应用液后,室温轻微振摇酶标板30秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。 11、重复第5个步骤5次,在吸水纸上将酶标板拍干。 12、在每个孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。轻轻振荡混匀。(A液、B液采用不同的吸头加样) 13、将酶标板置于37℃避光温育反应15分钟。 14、每个微孔中加入50μl的终止液,轻轻振荡混匀。 15、在酶标仪上,450nm处测定OD; 显色后,15分钟内进行测定。 16、根据制备的标准曲线,计算样本含量 五、结 果 判 断 1. 仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值; 2、检测值范围:0-40pg/ml 3、敏感度:0.1pg/ml

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