然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与第一次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合,洗板除去未结合,ELISA试剂盒加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,
实验规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、液体全部加完后,ELISA试剂盒可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
5、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,ELISA试剂盒加入0.1%的吐温6作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
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