供货周期: | 现货 |
品牌: | Abcam |
规格: | 0.1ml/0.2ml |
货号: | ys-6476R |
CAS号: | ys-6476R |
{英文名称}ACF1抗体
{中文名称}ACF1抗体,溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体
{规格}:0.1ml 0.2ml
{研究领域}肿瘤 细胞生物 神经生物学 信号转导 新陈代谢
{抗体来源}Rabbit
{克隆类型}Polyclonal
{交叉反应}Human, Mouse, Rat, Pig, Horse,
{产品应用}WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
{分 子 量}50kDa
{性 状}Lyophilized or Liquid
{浓 度}1mg/1ml
{免 疫 原}KLH conjugated synthetic peptide derived from human ALDH3A1
{亚 型}IgG
{纯化方法}affinity purified by Protein A
{储 存 液}Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
{保存条件}Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
PubMedPubMed
免疫荧光技术ACF1抗体,溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体的实验步骤
1. 直接免疫荧光法测抗原
⑴基本原理
将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。
⑵试剂与仪器
磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4
荧光标记的抗体溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释
缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份配制
搪瓷桶三只(内有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)
有盖搪瓷盒一只(内铺一层浸湿的纱布垫)
荧光显微镜
玻片架
滤纸
37℃温箱等。
⑶实验步骤
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+”表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
⑷注意事项
1)对荧光标记的抗体的稀释,要保证抗体的蛋白有一定的浓度,一般稀释度不应超过1:20,抗体浓度过低,会导致产生的荧光过弱,影响结果的观察。
2)染色的温度和时间需要根据各种不同的标本及抗原而变化,染色时间可以从10 min到数小时,一般30 min已足够。染色温度多采用室温(25℃左右),高于37℃可加强染色效果,但对不耐热的抗原(如流行性乙型脑炎病毒)可采用0-2℃的低温,延长染色时间。低温染色较37℃30 min效果好的多。
3)为了保证荧光染色的正确性,首次试验时需设置下述对照,以排除某些非特异性荧光染色的干扰。
① 标本自发荧光对照:标本加1-2滴0.01mol/L,pH7.4的PBS。
② 特异性对照(抑制试验):标本加未标记的特异性抗体,再加荧光标记的特异性抗体。
③ 阳性对照:已知的阳性标本加荧光标记的特异性抗体。
如果标本自发荧光对照和特异性对照呈无荧光或弱荧光,阳性对照和待检标本呈强荧光,则为特异性阳性染色。
4)一般标本在高压汞灯下照射超过3min,就有荧光减弱现象,经荧光染色的标本最好在当天观察,随着时间的延长,荧光强度会逐渐下降。
ACF1抗体,溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体供应 免疫组化问题解答:
1 染色过强
原因 解决方法
a 抗体浓度过高或孵育时间过长 降低抗体滴度、抗体孵育时间:室温1小时或4度过夜
b 孵育温度过高超过37度 一般在室温20-28度
c DAB显色时间过长或浓度过高 显色时间不超过5-12分钟,以显微镜下观察为准
2 非特异性背景染色
原因 解决方法
a 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3次每次5分钟
b 组织中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭孵育时间延长
c 组织中含内原性生物素 正常非免疫动物血清再封闭
d 血清蛋白封闭不充分 延长血清蛋白封闭时间
3 染色弱
原因 解决方法
a 抗体浓度过低、孵育时间过短 提高抗体浓度、孵育时间不能少 于60分钟
b 试剂超过有效使用时间 应更换试剂
c 操作中添加试剂时缓冲液未沥干 每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液
使试剂稀释 (应防止切片干燥)
d 室温太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分钟或4 度冰箱过夜
e 蛋白封闭过度 封闭不要超过12分钟
4 染色阴性
原因解决方法
a 操作步骤错误 应重试 设阳性对照
b 组织中无抗原 设阳性对照以验证试验结果
c 一抗与二抗种属连接错误 仔细确定一抗二抗种属无误。
YS-9149RAnti-TRIM35 TRIM35蛋白抗体
YS-7701RAnti-TP53TG3 p53靶蛋白3抗体
YS-4512RAnti-TUBB3/beta III Tubulin(Neuronal Marker) 神经细胞特异性微管蛋白抗体
YS-0086RAnti-TGF beta 1 转化生长因子β1/TGF β1/TGF-β1抗体
YS-3851RAnti-TNFSF9/CD137L 肿瘤坏死因子配体超家族成员9抗体
YS-3852RAnti-TNFRSF19/TROY 肿瘤坏死因子配体超家族成员19抗体
YS-4513RAnti-Transketolase(NT) 转酮醇酶(转羟乙醛酶)抗体(N端)
YSm-0919MAnti-TTX(5E7) 河豚毒素单克隆抗体
YS-4042RAnti-Triosephosphate isomerase 磷酸丙糖异构酶抗体
YS-7702RAnti-TP53TG5 p53靶蛋白5抗体
YS-4049RAnti-phospho-Tau protein(Ser262) 磷酸化微管相关蛋白抗体
YS-2392RAnti-phospho-Tau protein(Ser404) 磷酸化微管相关蛋白抗体
YS-4538RAnti-TGF Beta 1/2/3 转化生长因子β1抗体
YS-5435RAnti-Phospho-TAK1(Ser192) 磷酸化转化生长因子β活化激酶1
YS-7703RAnti-TSPYL5 睾丸特异性Y蛋白样5抗体
YS-7731RAnti-TRIP1/PSMC5 甲状腺受体相互作用蛋白1抗体
YS-2676RAnti-TSH 促甲状腺素抗体
YSm-2676MAnti-TSHB(2T11) 促甲状腺素单克隆抗体
YSm-2052MAnti-Transferrin(1F10) 转铁蛋白单克隆抗体
YS-2726RAnti-TPSB2 肥大细胞类胰蛋白酶β2
YS-6242RAnti-TAAL6/Transmembrane 4 L6 family member 1 肿瘤相关抗原L6抗体
YS-6991RAnti-Thrap3/TRAP150 甲状腺激素受体相关蛋白3抗体
YS-11613RAnti-TAS2R9 味觉受体蛋白家族2亚基9抗体
YS-2368RAnti-phospho-Tau protein(Thr231) 磷酸化微管相关蛋白抗体
YS-2374RAnti-TAP2/ABCB3 ATP结合转运因子2抗体
YS-4041RAnti-Transaldolase 1 转醛醇酶抗体
YS-5092RAnti-TNFSF15/TL1A 肿瘤坏死因子配体超家族成员15抗体
YS-3846RAnti-TGF beta 5/ TGF beta 1 转移生长因子β5抗体
YS-3849RAnti-TMEFF2 增生性息肉蛋白1抗体
YS-5418RAnti-phospho-Tau protein(Ser235) 磷酸化微管相关蛋白抗体
YS-5419RAnti-phospho-Tau protein(Thr212) 磷酸化微管相关蛋白抗体
YS-5420RAnti-phospho-Tau protein(Thr205) 磷酸化微管相关蛋白抗体
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