供货周期: | 现货 |
品牌: | Abcam |
规格: | 0.1ml/0.2ml |
货号: | ys-13887R |
CAS号: | ys-13887R |
{英文名称}CHCHD3
{中文名称}CHCHD3抗体/卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD3抗体
{规格}:0.1ml 0.2ml
{研究领域}肿瘤 细胞生物 神经生物学 信号转导 新陈代谢
{抗体来源}Rabbit
{克隆类型}Polyclonal
{交叉反应}Human, Mouse, Rat, Pig, Horse,
{产品应用}WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
{分 子 量}50kDa
{性 状}Lyophilized or Liquid
{浓 度}1mg/1ml
{免 疫 原}KLH conjugated synthetic peptide derived from human ALDH3A1
{亚 型}IgG
{纯化方法}affinity purified by Protein A
{储 存 液}Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
{保存条件}Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
PubMedPubMed
免疫荧光技术CHCHD3抗体/卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD3抗体的实验步骤
1. 直接免疫荧光法测抗原
⑴基本原理
将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。
⑵试剂与仪器
磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4
荧光标记的抗体溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释
缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份配制
搪瓷桶三只(内有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)
有盖搪瓷盒一只(内铺一层浸湿的纱布垫)
荧光显微镜
玻片架
滤纸
37℃温箱等。
⑶实验步骤
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+”表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
⑷注意事项
1)对荧光标记的抗体的稀释,要保证抗体的蛋白有一定的浓度,一般稀释度不应超过1:20,抗体浓度过低,会导致产生的荧光过弱,影响结果的观察。
2)染色的温度和时间需要根据各种不同的标本及抗原而变化,染色时间可以从10 min到数小时,一般30 min已足够。染色温度多采用室温(25℃左右),高于37℃可加强染色效果,但对不耐热的抗原(如流行性乙型脑炎病毒)可采用0-2℃的低温,延长染色时间。低温染色较37℃30 min效果好的多。
3)为了保证荧光染色的正确性,首次试验时需设置下述对照,以排除某些非特异性荧光染色的干扰。
① 标本自发荧光对照:标本加1-2滴0.01mol/L,pH7.4的PBS。
② 特异性对照(抑制试验):标本加未标记的特异性抗体,再加荧光标记的特异性抗体。
③ 阳性对照:已知的阳性标本加荧光标记的特异性抗体。
如果标本自发荧光对照和特异性对照呈无荧光或弱荧光,阳性对照和待检标本呈强荧光,则为特异性阳性染色。
4)一般标本在高压汞灯下照射超过3min,就有荧光减弱现象,经荧光染色的标本最好在当天观察,随着时间的延长,荧光强度会逐渐下降。
免疫组化问题解答:
1 染色过强
原因 解决方法
a 抗体浓度过高或孵育时间过长 降低抗体滴度、抗体孵育时间:室温1小时或4度过夜
b 孵育温度过高超过37度 一般在室温20-28度
c DAB显色时间过长或浓度过高 显色时间不超过5-12分钟,以显微镜下观察为准
2 非特异性背景染色
原因 解决方法
a 操作过程中冲洗不充分 每步冲洗3次每次5分钟
b 组织中含过氧化物酶未阻断 可再配置新鲜3%H2O2封闭孵育时间延长
c 组织中含内原性生物素 正常非免疫动物血清再封闭
d 血清蛋白封闭不充分 延长血清蛋白封闭时间
各类CHCHD3抗体/卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD3抗体主要功能有:
(1)IgG :血清中含量最高,因此是最重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。 IgG 还能激活补体,结合并增强巨噬细胞的吞噬功能(调理作用和 ADCC 效应),穿过胎盘,保护胎儿及新生婴儿免受感染。
(2)IgA :分单体和双体两种。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量最大,体内受感染后最早产生的抗体,具有很强的激活补体和调理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于诊断早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 细胞表面,是 B 细胞识别抗原的受体。
(5)IgE :血清中含量最少的抗体,某些过敏性体质的人血清中可检测到,参与介导 I 型超敏反应和抗寄生虫感染。
扁蓄苷Avicularin572-30-5HPLC≥98%20mg/支
细辛脂素L-Asarinin/ (-)-asarinin133-05-1HPLC≥98%20mg/支
15-羟基去氢松香酸15-hydroxy-dehydroabietic acidHPLC≥95%5mg/支
蒲公英甾醇乙酸酯taraxasteryl acetate6426-43-3HPLC≥98%10mg/支
欧夹竹桃苷Oleandrin465-16-7HPLC≥98%5mg/支
欧夹竹桃苷乙Adynerin35109-93-4HPLC≥98%20mg/支
金色酰胺醇酯aurantiamide acetate56121-42-7HPLC≥98%10mg/支
乔松素Pinocembrin480-39-7HPLC≥98%20mg/支
芫花素Genkwanin437-64-9HPLC≥98%20mg/支
小檗红碱Berberrubine15401-69-1HPLC≥98%20mg/支
二氢小檗碱Dihydroberberine483-15-8HPLC≥98%20mg/支
硫酸小檗碱Berberine Sulfate633-66-9HPLC≥98%20mg/支
叶酸Folic acid59-30-3HPLC≥98%20mg/支
麻枫树酚酮BJatropholone B71386-38-4HPLC≥98%5mg/支
11-羟基柳杉酚11-hydroxy-sugiol88664-08-8HPLC≥98%5mg/支
藤黄酸Gambogic acid2752-65-0HPLC≥95%20mg/支
喹乙醇;
喹酰胺醇Olaquindox23696-28-8HPLC≥98%20mg/支
孕甾烯醇酮;
妊烯醇酮Pregnenolone145-13-1HPLC≥98%20mg/支
阿朴-12'-番茄红素醛Apo-12’-lycopenal1071-52-9HPLC≥95%5mg/支
氧代川南亭碱衍生物HPLC≥98%20mg/支
琥珀酸;
丁二酸Succinic acid110-15-6≥99%100mg/支
虫草素Cordycepin73-03-0HPLC≥98%20mg/支
4'-去甲氧基表鬼臼毒素4'-Demethylepipodophyllotoxin衍生物6559-91-7HPLC≥98%20mg/支
D(十)-无水葡萄糖D(+)-Glucose水解产物50-99-7HPLC≥98%100mg/支
高香草酸Homovanillic acid合成物306-08-1TLC≥99%20mg/支
胆红素Bilirubin635-65-4HPLC≥98%20mg/支
地奥司明Diosimin以橙皮苷为原料的半合成产物520-27-4HPLC≥98%20mg/支
果糖Fructose7660-25-5HPLC≥98%20mg/支
左旋肉碱L-Carnitine inner salt541-15-198%20mg/支
大麦芽碱Hordenine539-15-1HPLC≥95%20mg/支
洛伐他汀Lovastatin75330-75-5HPLC≥98%20mg/支
麝香酮Muscone541-91-3GC≥98%0.15ml CHCHD3抗体/卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD3抗体
盐酸氨基葡萄糖Glucosamine Hydrochloride66-84-2HPLC≥98%20mg/支
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