大鼠前心钠肽含量检测,大鼠Pro-ANP ELISA

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大鼠前心钠肽含量检测,大鼠Pro-ANP ELISA检测试剂盒 ELISA试剂盒的实践技巧:
 1.
操作前应对实验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18 C25)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等,要先查看水育箱温度,ELISA试剂盒是否符合要求。
 2.
正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样次序要与说明书一致,否则可导致结果错误,实验重复性差。
3.
手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗涤次数不要超过说明书推荐的洗涤次数,洗液在反应孑L内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流,造成孔问污染,导致假阴性或假阳性。
4.
要保证加液量一致ELISA试剂盒我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量不准,造成显色不统一,判断错误。
 5.
显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反应,显色液量不能过多,以免显色过强。


大鼠前心钠肽含量检测,大鼠Pro-ANP ELISA检测试剂盒 试剂盒操作中出现的问题:现象、可能原因和解决办法:

1、 不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同,务必按照所用试剂盒严格操作,否则容易产生检测结果的不确定性.

2、 若不同批号试剂的不同组分(A液或酶工作液),或不同试剂的不同组分进行交叉使用,有可能出现显色浅或本底高,花板等情形。

3、 加样时样品量误差,对于阴或很阳的标本影响不大,但对阈值附近的标本影响极大,建议校对加样器。

4、 反应时间的误差,做大量标本时,第一孔和最后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。

5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加样器,不排除不同滴头滴量的误差。另外滴加过程中是否产生气泡、速度是否均匀,是否颤动等影响液量的因素均可导致以上情况。高标准要求时应使用加样器。

6、 阈值附近实际上是个灰区(gray scale),不能截然分为阴性、阳性,国外厂家均要求对这部分可疑标本进行奇数次复检,以次数多者为准,如一次阳两次阴最后判为阴,但实际上是否为阴不好说,只有判为可疑,临床上可以让患者过一段时间后再测。

7、 肉眼观察稍显色,酶标仪打印为阴性的标本在实际工作中是难以避免的,肉眼目测结果不可靠,应以酶标仪判读为准。

8、 由阴性变为强阳性原因多为操作过程中漏加试剂等有关。

9、 临界值附近标本波动为正常现象,任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。

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