供货周期: | 现货 |
品牌: | 方程生物 |
规格: | 48T/96T |
货号: | 现货 |
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我公司专业生产销售供应小鼠8异前列腺素含量检测、8-iso-PG ELISA检测试剂盒 厂家说明书以及免费代测
小鼠8异前列腺素含量检测、8-iso-PG ELISA检测试剂盒
ELISA操作步骤
1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9)在450nm波长处测定各孔的OD值。
小鼠8异前列腺素含量检测、8-iso-PG ELISA检测试剂盒
ELISA的血样本在收集、处理和保存方面要考虑的几个问题
(1)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。
(2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染。一是细菌的生长所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二是一些细菌的内源性酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。
(3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。
(4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。
(5)要注意避免出现溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,如血清标本中血红蛋白浓度较高,就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。
小鼠8异前列腺素含量检测、8-iso-PG ELISA检测试剂盒
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