移液枪是移液器的一种,常用于实验室少量或微量液体的移取,它有各种不同的规格,如单通道移液枪或多通道移液枪。在这两种移液枪下又各自包括不同的量程,如0.1-2.5μL、0.5-10μL、10-100μL、20-200μL、100-1000μL等等。不同规格的移液枪配套使用不同大小的枪头,不同生产厂家生产的形状也略有不同,但工作原理及操作方法基本一致。移液枪属精密仪器,使用及存放时均要小心谨慎,防止损坏,避免影响其量程。
移液枪的结构与工作原理
移液枪一般包括控制match按钮(不同厂家设计不同,通常也通过此按钮进行吸液体积调节)、吸头推卸按钮、体积显示窗、套筒、弹性吸嘴、吸头。
移液器的实质是一个活塞式吸管,利用空气排放原理进行工作,以活塞套内移动的距离确定移液枪的容量。依据移液模式的不同,可分为内置活塞式移液模式和外置活塞式移液模式。我们日常使用的为内置活塞式移液模式。
内置活塞式移液模式的吸头大多是通用的,但操作过程中比较容易发生交叉式污染,并且不宜吸取高粘稠度液体、挥发性较大的液体;外置活塞式移液模式中活塞与液体之间没有空气段,活塞为一次性的,对于粘稠度较大的液体,也能实现*确移液,另外,由于无空气间隔,避免了样品于空气接触可能发生的气雾交叉污染,因此非常适合是珍贵的试剂、生物样品的移取。
操作过程及注意事项
移液六部:设定容量值;装枪头;预洗枪头;吸液;排液;退枪头。
1设定容量值
操作之前请先选择正确量程的移液枪,在吸头最大量程的35-100%范围内操作可提高操作准确性与重复性。量程调节可分为两步:先进行粗调,通过旋转按钮将体积迅速调整至接近预想值。之后进行细调,将移液枪横置,通过调节按钮慢慢调至预想值。当由小量程调节至大量程时,朝所需量程方向连贯旋转,旋转到达超过所需量程1/3圈处再回调至所需量程,这样可避免“机械回冲”,确保更高准确性。当由大量程调节至小量程时,直接连贯旋转至所需量程。此步骤需注意,在调节枪的过程中切忌超过最大或最小量程,以免损害移液枪的*确度。
2设定容量值
移液枪顶端插入枪头,套柄用力下压,需要时小幅度旋转即可。注意不可用力敲击吸头。此操作会使枪头损坏,甚至造成移液枪套柄磨损,从而影响其密封性。
3预洗枪头
用同一样品重复吸液排液二至三次。对于微量移液器,该操作有助于内壁吸附,并且可以使大量程吸头内部的空气等于样品温度,保证操作的一致性。注意高温或者低温液体请不要润洗。
4吸液
先将移液枪排放按钮按至*一停点,再将枪头尽量保持垂直状态浸入液面,保持移液器在与垂直角度成20°范围内。枪头浸入深度可参考图七中所示建议深度,浸入太深会吸入过多的液体;相反,枪头位置过于接近表面会吸入空气;两种操作都会造成吸入量不准确。吸液时保持匀速连贯移液,控制好移液速度。快速或不平稳的吸液会使液体喷溅,产生气雾、套柄污染以及样品损失。吸液后在液面中保持一秒钟再将枪头平缓移开,并轻靠器壁去除枪头外壁挂存的液体。
5排液
排液时首先确认枪头内无气泡,枪头尖轻靠容器内壁,排出剩余样品,之后使其沿容器内壁向上滑动,避免液体粘在枪头口上。图九所示另外两种技巧同样适用于水溶(非粘性)液。
6退枪头
按动枪头推卸按钮卸掉使用过的枪头。注意与新枪头分开放置,以免发生交叉污染。移液枪使用后调回最大量程。
在使用移液枪时也应注意温度对移液准确性的影响。如理想的移液温度是21.5℃(±1℃)。仪器和样品的温度应与工作的室温相同,并且要避开可导致大幅或突然温度变化的通风或阳光照射区域。另外,经过长时间的移液,手上的温度会使移液枪变热,移液枪内部空气膨胀,也会导致结果不准确。因此在两次移液操作之间,应将移液枪放回支架,以避免手温对移液的影响。
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