兔骨形成蛋白ELISA试剂盒资料下载

2015-05-22 15:46  下载量:1

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Elisa试剂盒说明: 1.检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法 2.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。 3.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。 4.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。 5.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。 兔骨成型蛋白7(BMP-7)Elisa试剂盒操作步骤: 1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。 2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。 3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。 4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。 5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。 6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。 7、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。 8、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。 9、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s),37℃避光显色15min。 10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。 11、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。 12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

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