大家在做ELISA实验的过程中,难免会遇到各种不同的问题,比如标准曲线不好,试剂盒的回收率,假阴性,假阳性,实验的重复性不好等等。问题及解决方法如下:
1.OD值不正常
试剂盒未回温,试剂盒回温到25℃
温度控制不好,控制正确温度
孵育时间不准确,控制孵育时间
洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加,洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干
阳光直射,对着风直接吹,避风避
酶标仪的波长错误,酶标仪的波长450nm
抗体的稀释错误,正确的稀释抗体
解决方法:水质原因,用好的水质稀释。
2.白 板
洗涤液配制错误,正确的配制洗涤液少加液体(错加液体)。
解决方法:增加液体
3.无 梯 度
标准品也污染,换标准品点板OD值不正常。
解决方法:控制温度时间再做一次
4.线 性 不 好
OD值不正常,
解决方法:控制温度时间再做一次
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