型号: | PR Panta |
产地: | 德国 |
品牌: | 诺坦普 |
评分: |
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诺坦普 (NanoTemper) PR 系列蛋白稳定性分析仪
—— 精准表征蛋白稳定性的明星产品
Prometheus 可以让您在单次运行中测量热稳定性,聚集,粒径大小和分散性 - 无标记检测,仅需使用微量样品。依靠 Prometheus 获得可靠的、高分辨率的蛋白质稳定性数据,检测出不易被发现的稳定性行为, 让您对目标最佳候选分子和条件都更加充满信心。
• 超高分辨率的生物物理检测方法:通过了解影响蛋白稳定性的温度和化学条件,对蛋白功能进行更深入的剖析,从而全面了解蛋白质的折叠特性和结构域。使用 PR 系列蛋白稳定性分析仪,轻松改善蛋白纯化工作流程,快速排查各种生物制剂功能研究中的问题。
• 全面检测:快速测定不同缓冲液、盐浓度、pH 和离子对蛋白质热变性的影响。确定不同批次实验之间的相似性。
• 优化储存和制剂条件:精确测定不同贮藏条件对蛋白质稳定性的影响。确定最佳制剂条件,确保蛋白稳定性。
• 预测聚集:轻松预测蛋白聚集趋势,更全面地了解影响蛋白质稳定性的各类因素。
1. 技术优势
(1)天然条件下检测:无需添加染料或改变样品缓冲液。可检测粘稠样品。
(2)样品准备:样品直接吸入毛细管,上样极简单。
(3)数据精准:高密度的数据点意味着高质量的数据,其他技术遗漏的细节我们却可以得到。
(4)同步测量:同步得到 Tm、Tonset 和 Tturbidity 等多个实验结果。
(5)样品消耗少:10 μL 样品量 ,浓度 5 μg/mL 即可检测。
(6)检测更多条件:一次测试得到多个参数,使您更快获得结果。
(7)通量选择自由:灵活的样品数量,一次实验可做 1 个、48个或任意数量的样品,也可以选择全自动上样。
2. 技术原理
(1)微量差示扫描荧光技术 (nanoDSF)
PR 系列基于微量差示扫描荧光技术 (nanoDSF) 技术,可在天然条件下检测蛋白热变性和化学变性。蛋白中色氨酸和酪氨酸的荧光与其所处的环境密切相关。免标记的 nanoDSF 技术可以准确检测蛋白热变性和化学变性过程中内源荧光的变化。因此,通过检测荧光变化,可实现在非标记环境下测定蛋白的热稳定性或化学稳定性。更重要的是,数据质量不会受样品聚集影响。高质量的数据助您做出更好的决定。
PR 系列是通过检测蛋白的内源性荧光来跟踪其折叠状态。荧光信号的比值会随着温度的增加或化学变性剂浓度的增加 而变化,从而测定蛋白稳定性参数 Tm 值。
(2)背反射技术(Backreflection)
NanoTemper 公司研发的背反射光学模块主要用于检测蛋白的聚集现象。 蛋白的聚集检测主要基于颗粒的光散射效应。归功于 PR 系列产品使用的高精度毛细管和自动化的内部参比,聚集检测的重复性和灵敏性均优于传统方式。同时,由双通道 UV (Dual - UV Technologies) 检测模块获得的高密度数据能够同步监测蛋白的去折叠过程。热稳定性和聚集起始温度的同步检测,能非常快速的给您够提供精确、信息全面的蛋白稳定性分析数据。
(3)动态光散射技术(DLS)
用于检测水力学半径,均一性以及自相互作用 KD
图 1:激光 (紫色虚线) 被溶液中的粒子所散射,散射光(紫色波浪线)被用于检测粒子的布朗运动。
图 2 :仪器采集散射光强度随时间的波动,较小的粒子扩散得更快,导致波动强度比较大的粒子更大。因此, 散射光强度的波动可用于提取扩散系数和计算粒子尺寸。
图 3:自相关函数描述了一个粒子在一段时间内在同一位置被发现的概率 (用 Tau 表示 )。当较大的粒子经 历较慢的布朗运动时,它们的自相关函数经历较慢的衰减,而较小、较快的粒子的自相关函数衰减得更快。
图 4:拟合自相关函数来确定扩散系数 D,并代入 Stokes-Einstein 方程。该方程与粒子的大小 (半径) 和扩 散系数有关,由此可以确定溶液中粒子的大小。
(4)静态光散射技术(SLS)
与动态光散射不同,静态光散射检测的是溶液中所有粒子的平均散射光强度 , 计算样品的分子量以及第二维里系数 B22。
3. 简单、灵活的分析软件
Prometheus Panta 配备了 Panta Control,Panta AutoControl 及 Panta Analysis 三个软件,助您轻松完成多参数蛋白稳定性分析。您可通过 Panta Control 软件在一次升温过程中同时且实时检测样品的Tm 、Tonset、Tturbidity、Tsize 和 Tscattering,单独运行光散射模块进行自相互作用分析,通过化学变性实验检测样品去折叠的自由能 ΔG 或进 行加速实验。Panta AutoControl 软件可帮您完成 1356 个样品的自动化筛选。Panta Analysis 软件可进行重复样品的统计分析以及数据叠加呈现。您可自定义所需呈现的检测参数,设定模板进行标准化分析并批量导出数据。
4. 典型应用
(1)抗体可开发性评估
(2)可比性研究
(3)多参数高通量制剂筛选
(4)化学变性实验
(5)高浓度样品聚集预测-DLS
(6)高浓度样品聚集预测-SLS
(7)片段化合物库筛选
(8)结合分枝杆菌延伸因子药物筛选
(9)蛋白液 - 液相分离药物开发
(10)核苷酸糖转运蛋白底物调控机制
(11)酶库高通量筛选
(12)高通量膜蛋白去垢剂筛选
—— 技术参数 ——
PR 系列已经被世界各地的顶尖科研机构选择和认可,作为蛋白稳定性表征的新黄金标准,被应用于各类蛋白的研究中。用 PR 系列检测蛋白质稳定性和蛋白质聚集的操作门槛极低,几乎不需要任何使用经验。仪器小巧且无需维护。您只需根据使用通量来选择产品型号。
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