细胞凋亡检测

2016-05-27 15:50  下载量:1

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细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分重要。同时,了解细胞死亡和存活机制也是毒理分析和药物研发应用中一个非常关键的内容。 Sigma?联合Roche?提供多种分析细胞凋亡的研究方法。包括:Caspase活性检测;DNA片段化分析和检测;膜变化检测(AnnexinV染色、膜电位、线粒体功能完整性分析检测实验)及细胞形态学检测。 在凋亡细胞的细胞质中出现的组蛋白联合的DNA片断(单链及寡聚小体),可使用Cell Death Detection ELISAPLUS(11774425001)高通量地检测细胞死亡,或使用Apoptotic DNA-Ladder Kit (11835246001)通过纯化及琼脂糖电泳分析这些呈现出典型的ladder状态的DNA片断。 细胞形态学检测 细胞形态的变化如胞膜皱摺或出泡、核染色质致密、胞质浓缩等,都可作为细胞凋亡的证据。一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA特异性染料有:Hoechst 33342 (B2261),Hoechst 33258 (B2883), DAPI (D9542)。三种染料与DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。

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