DIY夹心法ELISA常见技术指南

上海邦景实业有限公司

DIY夹心法ELISA常见技术指南：

1、选择抗体时最好选择一个单抗和一个多抗进行配对；若选择两个单抗，必须识别不同表位的抗体；最好从同一家公司选择抗体对。

2、ELISA实验中为了确定最佳信号和最低背景应将捕获抗体（0.5-4μg/ml）和检测抗体（0.25-2μg/ml）在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时，应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。

3、标准品的配制：对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。

4、一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml 到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。

5、为了优化灵敏度，建议过夜孵育标准品和标本。

6、若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。

7、当测定混合液体中的抗原时，如血清，建议在标本稀释液中加不相干的Ig.Galectin 1 半乳糖凝集素1抗体

GANAB α葡萄糖苷酶2抗体

Galectin 7 半乳糖凝集素7抗体

GCDFP15 特异性囊肿病液体蛋白15抗体

GCET1 B淋巴细胞生发中心相关蛋白抗体

GASC1 鳞状细胞癌增强蛋白1抗体

G alpha gust Gα gust抗体

GLS1 谷氨酰胺酶抗体

GCMA 绒毛膜特异性转录因子GCMa抗体

GBP5 G蛋白结合蛋白5抗体

Cancer/testis antigen family 4 member 7 肿瘤/睾丸抗原家族4亚型7抗体

GFR alpha 3 GDNF家族受体α3抗体 GFR α3

GLRB 甘氨酸受体β/GlyR β抗体

GALP 神经甘丙肽样肽GALP抗体

GALR2 甘丙肽受体2抗体

GALR3 甘丙肽受体3抗体

Ghrelin Receptor 脑肠肽受体抗体

GRC5 GRC5蛋白抗体

Gbx1 肠和大脑特定同源蛋白1抗体

GDF6 生长分化因子6抗体

GEFT 鸟嘌呤核苷酸交换因子GEFT抗体

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