ELISA试剂盒干细胞生物学性状的研究

上海邦景实业有限公司

2016/01/06 14:18

目前国内外均有成功分离羊水来源干细胞的报导，ELISA试剂盒大多是利用羊水细胞贴壁的特点通过多次传代的方法获得干细胞。Tsai MS 等采用两步培养法从孕中期羊水中成功分离出具有MSCs 特征的干细胞。随后De Coppi 等通过免疫磁珠方法分离出c － Kit （ CD117）阳性细胞，这些细胞在体外增殖迅速，可以形成稳定的细胞系，他将这些细胞命名为羊水干细胞。此外通过克隆化培养的方法也可以从羊水中获得干细胞。ELISA试剂盒从现有研究情况看来，目前尚未形成统一的羊水干细胞培养体系。
本实验采用贴壁法分离获得羊水细胞，培养细胞使用低糖DMEM 培养基。收集的20 例羊水标本中有17 例原代培养成功，并获得可以持续传代的稳定细胞系。培养的羊水细胞体外增长迅速，ELISA试剂盒倍增时间约36h。流式细胞仪检测显示细胞表达CD29、CD44、CD105 等间充质干细胞表面标志，不表达造血干细胞表面标志CD45 和CD133。RT － PCR 的结果表明分离获得的干细胞表达Oct － 4 和Nanog 基因，且不同代的细胞间均有表达。Oct － 4 和Nanog 被认为是干细胞多能分化的主要调节因子，干细胞分化后其表达立即下调。以上结果与文献报道一致，表明羊水细胞经体外培养扩增可以得到具有MSCs 性质的干细胞。

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