沃特世OBD色谱柱设计

沃特世OBD色谱柱设计

沃特世已将高压匀浆填充与经过仔细计算的轴向压缩因素相结合，应对于柱头装填密度较小的部分。

按照制备柱OBD设计理念，并按每种填料类型和每种柱规格的立体几何学加以精心微调的实际操作工艺，就可以获得可预测的、对整个柱床长度都均匀一致的装填密度。在装填结束后的封柱过程中，沃特世柱装填操作依从仔细严格的操作流程，从而确保不会以任何不均匀的方式过度压缩或扰动柱端部分。

OBD制备柱硬件设计包括一对精心设计的分流板和化学惰性密封圈，以防止在高压操作下出现漏液情况。

OBD制备柱装配件图解

OBD空柱部件分解图

优化的OBD制备柱技术确保柱效更高

OBD制备柱计算器

设计用于简化常规制备计算：

1、柱/管路背压

2、样品载量放大

3、梯度流程放大

4、梯度设计

可直接放大—准确可靠的表现分析柱的分离效果

纯化工作者大都遇到这样的情况；即使使用和分析柱完全相同的填料颗粒，色谱分离往往也不能“直接放大”，总是会出现分离度降低或上样量下降的问题。

OBD制备柱的柱床密度与分析柱相当，具有优异的稳定性、重现性和柱效，能够保证分离的直接放大，并避免在制备分离时重新开发方法。

更长和可预测的制备柱寿命

采用反相技术进行分离，组成复杂的待分离粗品经常需要用强溶剂如DMSO进行溶解，由于粗品在流动相中的溶解度低，加上大体积纯有机溶剂进样对制备柱产生的压力冲击，是导致制备柱过早失效和柱床塌陷的主要因素。

OBD制备柱具有极佳的柱床稳定性，根本不会塌陷，而且柱与柱间性能完全一致，使用寿命大大延长，从而降低了使用成本。

来自药物开发实验室的数据：在一根XBridge C 18 ，5μm 19×50mm OBD制备柱上进样7000次的结果

从分析柱到制备柱直接放大，常用计算公式：

流速可用于计算与分析柱应用时完全相当的线性流速条件下对应于更大色谱柱的体积流速。但是，合理的流速将取决于柱规格。当柱长增加、粒径减小时，柱背压会相应增加，会受到液相系统耐压性的限制。

梯度持续时间估算：

制备柱上样量预估

对于OBD制备柱的大概上样量(毫克)，梯度洗脱模式时：

¹ 合理流速取决于柱内径。随柱长增加及填料粒径减少，柱背压增大，使用时会受到液相设备的耐压性的限制。在制备柱上的梯度持续时间，应按照与分析柱应用时相等的梯度洗脱体积与柱体积之比的倍数因子计算(计算公式见“梯度持续时间估算”公式)。

² 此处进样体积数值基于50mm柱长并使用较强溶剂溶解样品时。如增加柱长，进样体积亦可增加，但并不成正比。使用较弱强度的溶剂溶解样品，能显著提高进样体积量。

制备柱的样品载量受制于许多因素。以上所列数据仅为“平均状况下”的预估值。通常规律有：

1、强保留的目标物载量较大

2、样品简单时载量较大

3、需要高分辨时载量降低

4、样品载量受上样条件影响很大：

（1）受限于样品体积

（2）受限于样品溶剂的强度

5、对于肽样品，其载量主要取决于目标肽序列以及肽样品的溶解性，建议按所列值的5-20%预估。