分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。
物理意义
当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时, 其吸光度 A 与吸光物质的浓度 c 及吸收层厚度 ι 成正比,而透光度 T 与 c、ι成反比,即,A = lg(1/T) =k * ι* c → c = A / (k * ι)
这就是光吸收的基本原理Beer-Lambert’s law 比尔—朗伯定律
其中,
? A 为吸光度
? T 为透射比(透光度)是出射光强度(lt)比入射光强度(l0)
? k 为摩尔吸收系数,它与吸收物质的性质及入射光的波 长 λ 有关
? c 为吸光物质的浓度,单位为 mol/L
? ι为吸收层厚度,一般以 cm 单位
VWR 推出mySPEC 系列多功能分光光度计,适用于微量核酸和蛋白质样本的浓度和纯度测定。
mySPEC Twin 系列具有一个额外的比色皿端口,可用于测量细胞密度或酶活性。预设测定程序,针对不同应用,实现快速、完整的自动数据分析。
应用包括RNA和DNA的浓度和纯度测定、蛋白质测量(A280,Bradford, Lowry,BCA,Pierce 660 法)、标记效率测定、比色法测定酶活性和细胞密度测量。
工作原理
mySPEC 技术
通过静电形成液柱,起始最长光程路径(1 mm)。将下光纤表面移动靠近上光纤表面,形成较短光程(最短可达0.05 mm):通过静电拉开样品,然后进行挤压。
1. 使用mySPEC移液器将1 μl样品直接滴到下光纤表面上
2. 闭合取样臂
3. 形成样品液柱,调节最佳光程,然后开始测量。由于具有“自动开始”功能,无需按“测量”。几秒内即可显示测量结果,可轻松保存为文档或进行打印
4. 只需简单擦拭光纤表面,即可进行下一次测量
产品优势
利用分光光度计通用mySPEC系列,用户可以对极少样品量中的所含的核酸和蛋白质进行量。Twin系列拥有额外的比色皿用端口,以便进行细胞密度或酶活性测量。预配置模组可对一系列应用进行快速、全自动数据分析,包括RNA和DNA浓度和纯度,蛋白测量(A280, Bradford, Lowry, BCA, Pierce 660),标签效率测定,酶活性比色测定和细胞密度测量。
? 只需1 μl样品
? 操作简单,无需比色皿,只需移液器即可测量(<5秒),然后擦掉
? 测量范围从2 ng/μl到15 μg/μl(ds DNA),避免易于出错的稀释和计算
? Twin系列结合微量和比色皿功能,可对样品进行温度控制(30-40 °C)和搅拌
(0/50/1000每分钟)
? 独立式8.4英寸触摸屏版本可选
? 用户定义纯度设置后可自动进行数据分析
最小加样量
mySPEC 超微量紫外可见光分光光度计可用于微量体积的浓度和纯度测定,针对不同样品,其最小加样量不同。
核酸:1 μl
高浓度核酸:1,3 - 2 μl
蛋白:2 μl
Bradford、BCA、Lowry或Protein Pierce 660 nm试剂:2 μl
微生物细胞悬浮液:2 μl
测试结果对比
我们采用mySPEC和某品牌的同类产品对6份不同浓度的dsDNA样品进行了测定,得到以下数据,
通过对比后我们发现:
? 两种仪器的测量结果相同
? mySPEC的测量结果具有更为出色的再现性(标准偏差小)
结果表明:mySPEC的测量精确度更高.如此看来,这款超微量分光光度计真的很skr!
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