使用KeyPro污染净化仪,防止RNA的降解,保证PCR结果的准确性

2020-02-19 10:29  下载量:1

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在此次的新型冠状病毒疫情中,核酸检测作为确诊的金标准发挥着重要的作用。众所周知,本次新冠病毒的核酸检测流程为采样(咽拭子、肺泡灌洗液),提取病毒RNA,再经过RT-qPCR或者一步法RT-数字PCR检测样本。但近期关于核酸检测准确性的讨论也甚嚣尘上,其中PCR实验污染是导致实验有偏差的原因之一, 造成PCR实验污染的主要原因有以下几点,样本间交叉污染(样本泄漏引起的交叉,样本提取过程中移液器、耗材的污染),PCR试剂的污染(容器、耗材、移液器,水等被污染),PCR扩增产物污染,气溶胶污染,克隆质粒污染等。 在病毒核酸检测过程中,结果的准确性除了检测方式的灵敏度很重要以外,保证提取RNA样本的完整性也十分重要。今天我们就聊聊如何防止RNA降解,获得高质量的RNA进行后续试验。导致RNA降解最主要的物质就是RNase,RNase非常稳定,且无处不在,用常规的高温高压蒸汽方法和蛋白酶抑制剂不能使所有的RNase完全失活。

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