安捷伦蛋白质200HT-2分析

上海善福电子科技有限公司

2021/12/31 09:09
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在安捷伦蛋白质200HT-2分析5100自动化实验室芯片平台上运行，其蛋 白质大小将从15到220kDa不等。在变性条件下进行分析， 在没有或不存在还原剂的情况下。蛋白质样本在自动高通量模式下进行 分析。本技术说明详细描述了蛋白质200HT-2分析的技术背景、工作流 程和性能。它还描述了由5100专家高温软件进行的蛋白质特异性数据分 析。

最近推出的安捷伦5100自动芯片上 实验室平台(5100ALP)基于与安捷 伦2100生物分析仪相同的原理，并 支持无人参与的高通量、大小和定 量DNA和蛋白质样本1。样品处理、 电泳测量和数字数据分析都是完全 自动化的，允许每天处理1000多个 样品。该系统提供了无人参与的和 高度可重复性的蛋白质分析 标准96井板

与传统的sdspage实验相比，蛋白 质平行光电分离，分离在一个时 间点停止，蛋白质200HT-2分析按 顺序分离蛋白质，并在固定的迁 移距离处进行检测。与sdspage类 似，蛋白质标准阶梯被用来确定 样本中未知蛋白质的分子量。蛋 白质200 蛋白质200HT-2测定法的HT-2阶梯 如图2A所示。 它由6个已知大小为15、28、15、 46、63、95和150kDa的蛋白峰组 成，其中一个上标记蛋白为 240kDa。此外， 在15kDa峰之前可以看到2-3个系 统峰，这代表了一些十二烷基硫 酸盐胶束，其中也包含了插入染 料。梯子还包含一个较低的标记 (图2A中没有所示)，在与蛋白质 不同的发射波长下检测到，并用 于 对准（请参见“样本对准”章节 中的详细信息）。该软件通过绘 制已知大小的曲线来生成一条标 准曲线 反对其迁移时间的阶梯蛋白（图 2B）。然后用阶梯标准曲线计算未 知蛋白质的分子量。每个样本都包 含一个下部和上面的标记作为内部 标准

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