基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)彻底改变了真菌鉴定。虽然基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)已成为少数实验室的常规仪器,但是离普及路途尚远。其中一个主要障碍便是缺乏简单、可重复和均匀的蛋白质提取流程。
美国国立卫生研究院临床中心的研究人员进行了一项研究,在这项研究中,他们开发并验证了一种用于丝状真菌的快速一步法蛋白质提取方案。相关研究结果发表在Diagnostic Microbiology and Infectious Disease上面(https://doi.org/10.1016/j.diagmicrobio.2018.01.015)。
研究人员将切下的霉菌放入含有氧化锆-二氧化硅珠和提取溶液的管中,无需洗涤或乙醇灭活步骤。评估含有不同比例的乙腈和甲酸的萃取溶液。然后使用PowerLyzer强力珠磨式破碎仪处理样品,并将上清液点样用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测。将快速方法进行前瞻性评估,并与研究人员目前的霉菌提取方案平行评估3个月。对106例临床霉菌分离株进行分析后,可提高提取性能,并将提取时间缩短30分钟,直至5分钟的实际操作时间。研究结果显示,通过快速方法,高达63.0%的霉菌分离物获得了可接受的鉴定评分,而目前的常规方案仅有52.8%的分离株获得可接受的鉴定评分。重复斑点之间的分数比较,结果显示与常规方法相比,快速方法具有更高的重现性。
该研究表明,快速提取方法可以在预定的批量运行中和按需的基础上对临床霉菌分离物进行有效分析, 同时为采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行霉菌识别的实验室提供一个简单的启动平台,这将十分有利于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的普及使用。
在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的普及使用方面,融智生物也做了很多工作。
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)成功地使质谱得以分析生物大分子,并因此获得2002年诺贝尔化学奖。目前,MALDI-TOF MS已应用于微生物鉴定、肿瘤标志物测定、生物组织成像等领域。
“定量”以及“宽谱分析”成为阻碍传统MALDI-TOF MS进入临床的关键因素,通过对传统MALDI-TOF MS光、机、电、软等全方位的重新设计与研发,融智生物新一代宽谱定量飞行时间质谱QuanTOF不但具备传统MALDI-TOF MS拥有的所有能力,同时在定量、大分子检测、宽谱分析以及质谱成像等方面都有质的提升。新一代宽谱定量飞行时间质谱QuanTOF分析平台为MALDI-TOF MS拓展了更广阔的的应用领域,使其在普及使用的道路上前进了一步,同时使其成为满足临床定量分析需求的MALDI-TOF MS产品。
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