Bruker 液相色谱系统 nanoElute® 2

Bruker 液相色谱系统 nanoElute® 2

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品牌: 布鲁克
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冠乾科技(上海)有限公司
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液相色谱

nanoElute® 2

性能
超尖锐色谱峰提供极佳蛋白质组学性能
灵活性
灵活的用户控制功能和进样模式
耐用性
改进的泵设计实现无与伦比的重复性和稳定性
用户友好型
友好操作界面适合初学用户使用,也可辅助专家级用户进行故障排查

nanoElute® 2

依托上一代液相的核心原理,nanoElute® 2 拥有前所未有的稳定性、色谱性能和易于操作等特点。

  • 泵拥有无与伦比的重复性和稳定性 

  • 超尖锐色谱峰提供极佳蛋白质组学性能 

  • 灵活的用户控制功能和进样模式 

  • 适合新手的用户友好型操作界面 

  • 协助专家级用户故障排查 

  • 全自动样品制备流程 

  • 极致灵敏度实现真单细胞水平非标定量工作流程

nanoElute® 2 涵盖了从单细胞到常规高通量蛋白质组学的广泛应用。新一代液相系统能给您带来极致分离度,蛋白质鉴定及定量深度。

叠加提取离子色谱图
上图为连续进样 10 针提取离子流图( 27 条多肽 )的叠加图。20 fmol BSA 酶切产物( Bruker Daltonics 8217498 )上样至 PepSep TWENTY-FIVE 色谱柱( 货号 1893476,内径 150 μm, 粒径 1.5 μm ),使用 10 min 梯度进行分离。
 
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纳米埃卢特 2 和 timsTOF HT

前所未有的重复性和稳定性

前所未有的重复性和稳定性通过以下部分实现: 

  • 新的、更坚硬的切换阀带来更长的使用寿命 

  • 改进的泵设计 

  • 手拧式、扭矩限制毛细管实现无漏液、零死体积连接,没有过度拧紧或损坏连接毛细管的风险

数百次注射的稳定保留时间
数百次进样保持稳定的保留时间。(A)400 针连续进样中提取八条肽段的保留时间。20 fmol BSA 酶切产物( Bruker Daltonics 8217498 )上样至 PepSep FIFTEEN 色谱柱( 货号 1895814,内径 75 μm, 粒径 1.9 μm ),使用 10 min 梯度进行分离。(B)保留时间中位值归一化的箱线图结果显示, 8 条肽段中每一条肽段的平均保留时间偏差均小于 2 秒。
纳米埃卢特 2

超尖锐色谱峰实现极佳蛋白质组学性能

 nanoElute® 2 为不同时长的梯度提供精确且可重现的梯度分离,能够实现极窄的峰宽和出色的峰容量。

50 ng K562 消化液在不同梯度长度下的可靠性能
不同梯度时针对 50 ng K562 细胞消化液的可靠分析结果。 (A)洗脱峰箱线图表明了一致且窄的峰宽( 更长梯度仅增加少量峰宽 )(B)不同梯度时长的蛋白质和母离子鉴定结果( timsTOF Pro 2 使用 DDA-PASEF 采集模式,带有 TIMScore™ 功能的 Bruker ProteoScape 实时数据库搜索结果 )

nanoElute® 2 与 timsTOF HT 联用,所有的数据都有非常出色可靠的性能表现( 详见图 C )。1600 ng K562 细胞消化液使用 41 min 的液相运行时间,DDA-PASEF 模式进行数据采集。

高肽量的可靠性能
高上样量的可靠表现 。使用胰蛋白酶消化的 K562 细胞系,PepSep Twenty-five 系列色谱柱( 150 μm 内径,1.5 μm 粒径 ),timsTOF HT 使用 DDA-PASEF 采集模式 41 min 可以鉴定到 6800 多个蛋白( 带有 TIMScore™ 功能的 Bruker ProteoScape 实时数据库搜索结果 )。

用户友好型且无故障的色谱

凭借切换阀的独特设计,nanoElute® 2 可通过软件控制 trap 柱进入流路和反向冲出样本以获得更尖锐的色谱峰。它依旧保留了前一代液相的理想功能以确保:

  • 动态实时方法配置 

  • 高效、预设的的色谱柱清洗和平衡过程 

  • 全集成智能化软件控制 

  • 质量性能监控和漏液管理系统 

  • 单柱法、双柱法和直接进样模式无缝切换

这些功能保证了仪器的高性能、灵活性和稳定性,带给您更加可靠的结果。

全自动自测和诊断嵌入到软件界面,操作方便,适合初学用户使用,也可辅助专家级用户进行故障排查。

新程序允许对液相流路进行逐步评估,以便轻松定位潜在发生问题位置,从而进行故障排除和维护。

样品制备程序为用户自定义的性能评估、自动进样器清洗和溶剂替换提供了灵活性。

 

自动化样品制备工作流程

自动化样品制备流程可根据用户自定义,有效减少手动制备带来的影响。以下功能提供了在 LC-MS 分析之前溶解和混合样品的方式: 

  • 样品瓶取样

  • 溶解

  • 衍生

进样前一致的样品制备
液质分析前不同上样流程。100 ng K562 样品的基峰离子流图。100 ng K562 消化液上样至 PepSep Twenty-five 色谱柱( 内径 150 μm,粒径 1.5 μm ),肽段在进样之前通过自动进样器重溶于 0.001% DDM( 鉴定到 52589 +/- 1020 个母离子 ),而预先溶解在 0.001% DDM 中的肽段样本作为对照组( 鉴定到 51475 +/- 699 个母离子 )

优化的平台用于充满挑战的组学分析

适用于低样品量和单细胞应用
低上样量和单细胞样本分析时可靠的结果。使用 lonOpticks Aurora 色谱柱,在 45 min 的运行时间内从 62.5 pg 到 32 ng Hela 胰蛋白酶消化液上样量中分别鉴定到 1400 到 7100 个蛋白质( 图A ),7000 到 59,000 个母离子( 图B )。timsTOF SCP 采用 dia-PASEF® 采集模式以及 TIMScore™ 加持的 Bruker ProteoScape 实时数据库搜索结果。

timsTOF SCP 与 nanoElute® 2 UHPLC 系统相结合,实现了前所未有的灵敏度。dia-PASEF® 结果显示,1 ng HeLa,80 min ( 对应 66 min 梯度 ) 运行时间可鉴定约 4000 个蛋白和 22000 个母离子。

对无标记单细胞水平工作流程极高的灵敏度

使用 nanoElute® 2 和 timsTOF SCP 进行从头到尾的单细胞非标记蛋白质组学工作流程。nanoElute® 2 直接使用 cellenONE 细胞分选系统中使用的非标记流程 proteoCHIP 支架进样。在分选和制备之后,无需移液步骤, 多达 144  个单细胞可直接从 cellenONE 转移到 nanoElute® 2 自动进样器,并用 timsTOF SCP 和 TIMS-DIA-NN 进行超高灵敏度蛋白质组学分析。

全自动无标记单细胞蛋白质组学工作流程
全自动非标记单细胞蛋白质组学工作流程。cellenONE 非标记流程使用的 proteoCHIP 支架和 nanoElute® 2,在 timsTOF SCP 和Bruker ProteoScape 上进行超高灵敏度单细胞数据分析。
重复注射不同肽浓度
分别使用进样瓶( 灰色 )和 proteoCHIP( 蓝色 )按照指定体积重复上样 250 pg、1 ng 和 2 ng HeLa 细胞消化液,25 min 运行时间 下在蛋白质(A)和肽段(B)水平显示出了极佳的重复性。

 

直接从非标记流程的 proteoCHIP 孔中进样 250 pg 和 1 ng( 总体积为 1 μL )和 2 ng( 总体积为 2 μL )的 HeLa 细胞消化液,结果表明了极高的蛋白质和肽段鉴定重复性。对比非标记流程的 proteoCHIP 和进样瓶的进样方式,在不同肽段浓度和体积下,蛋白质和肽段鉴定的结果并无显著差异。


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