筛选高表达IgG克隆新应用

克隆表达重组抗体的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞是开发单克隆抗体(mAb)治疗方法的至关重要的载体。寻找高IgG克隆的过程通常涉及大量的克隆筛选,费力又耗时。冷捕获技术使得这种筛选效率更高。该技术在低温条件下,用荧光分子标记产生抗体的细胞与分泌的靶点蛋白结合。这种标记帮助实现基于荧光信号水平的细胞分选,以选择更高生产率的细胞。

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Biogen,Pfizer等公司一致表明冷捕获和单细胞分离相结合是一种高效获得高富集IgG单克隆的方法。使用Namocell Pala单细胞分离仪进行单细胞分离,结果显示与非冷捕获细胞相比,冷捕获标记细胞的IgG产量平均高3倍左右。

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目前常见的单克隆分离方法:

有限稀释

将细胞稀释到极低密度使得每个孔仅含有一个或更少的细胞,此方法高度依赖人工,获得率低且耗时。

FACS

需要大量的起始细胞且分选过程会对细胞产生较大的压力,影响细胞活性。

Namocell Pala 单细胞分离仪

与传统的FACS相比,该技术具有:

•低鞘液压力(< 2psi),确保细胞的活性和功能

•操作简单,无需专门维护。固定光路,无需校准,开机即用

•整机轻巧,可置于生物安全柜中

•一次性分离芯片,样本无共用管道,杜绝了样本间的交叉污染

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细胞株开发时,单克隆的筛选和分离是取得成功的关键步骤。Namocell Pala 单细胞分离仪结合冷捕获技术获得高表达IgG克隆。该方式可以简化加速工作流程,为下游生产出更多优质高产的细胞。


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