小鼠尿激酶型纤溶酶原启动因子受体(uPAR)ELISA试剂盒

小鼠尿激酶型纤溶酶原启动因子受体(uPAR)ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗UPAR单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的UPAR会与单抗结合，游离的成分被洗去，加入生物素化的抗UPAR抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合，抗UPAR抗体与结合在单抗上的UPAR结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去，加入显色底物，若反应孔中有UPAR，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄，在450nm处测OD值，UPAR浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中的UPAR的浓度。

产品名称：小鼠尿激酶型纤溶酶原启动因子受体(uPAR) ELISA试剂盒

简称：UPAR试剂盒

规格：96T/48T

检测范围：125-8000pg/mL

检测限：47pg/mL

重复性：板内变异系数＜10%

板间变异系数＜15%

1. 产品有哪几种规格？可检测多少个样本？

产品规格为96T/48T。

小鼠尿激酶型纤溶酶原启动因子受体(uPAR)ELISA试剂盒每次实验的标准曲线一般设7个不同浓度，加上空白孔，标准曲线一共需要8个孔。因此，一个96T试剂盒最多可以测定88个样本（不做重复且一次用完）。板条可拆卸，可满足您少量多次实验需求。

2. 产品的稳定性如何？

产品在研发前期已通过严格的稳定测试，发货前亦须通过检测并提供质检报告，在市场上深受广大客户的赞许！

3.一次ELISA实验需要多长时间？

双抗体夹心ELISA法一次实验需要3.5-4小时，竞争ELISA法一次实验需要2-2.5小时。

4.血清样本如何处理？

全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 血浆样本如何处理？

建议选择EDTA或者柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，于1000×g离心15分钟，仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

6.细胞上清液样本如何处理？

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（1000×g）。仔细收集上清。

7.细胞裂解液样本如何处理？

小鼠尿激酶型纤溶酶原启动因子受体(uPAR)ELISA试剂盒检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或者超声破碎，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心10分钟左右（5000×g）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

8.组织样本如何处理？

用预冷的PSB (0.01M,pH=7.4)冲洗组织，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。高将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟，取上清检测。

9.为什么有的试剂盒是采用竞争ELISA法？

小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争生物素化抗体上的结合位点，标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的生物素化抗体愈少，高的显色也愈浅，即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激素等ELISA测定多用此法。

10.用什么软件处理ELISA检测的数据比较好？

小鼠尿激酶型纤溶酶原启动因子受体(uPAR)ELISA试剂盒ELISA标准曲线拟合可以应用Curve Expert软件进行数据分析。它使用非常方便，可以生成漂亮的曲线应用到论文之中。软件可以在下载中心进行下载。

11. 试剂盒做的结果不理想怎么办？

实验结果不理想请及时与客服或技术支持联系，我们可以帮您一起分析实验结果。如果仅凭实验数据无法判断，您可以将试剂盒发回给我们进行售后检测。如果是试剂盒本身的质量问题，可以为您退换货；如果是实验操作的问题，技术人员可以给您一些改进的建议。

12.使用 ELISA Kit发表论文有奖励吗？

如果您使用ELISA Kit且已发表论文，可以获得300～1000元奖学金或代金券

13.怎样处理elisa实验结果？

1.ELISA实验中样品都要做复孔或三孔，然后计算每个浓度标准品的平均OD值，复孔的变异系数应该小于10%。

2.平均OD值减去空白孔的OD值(竞争法不需要减空白孔的OD值)。

3.制作标准曲线。

      以减去本底后的OD值为X轴，标准品的浓度为Y轴，利用作图软件得出一个合适的计算方法。建议使用合适的软件来作图，比如CurveExpert 1.4。这款软件能够给出很多种方法（比如直线、半对数、对数、四参数方程等）并从中选择一条最合适的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据吻合，可以将标准品的浓度作为未知数，将对应的OD值带入该方程，计算出标准品的浓度，得到的结果应该与实际浓度很接近（+/-10%）。选择拟合度高的那条曲线。