TOR1B蛋白；耐扭蛋白1B(TOR1B)重组蛋白

TOR1B蛋白；耐扭蛋白1B(TOR1B)重组蛋白

英文名称：Recombinant Torsin 1B (TOR1B)

DQ1; Torsin ATPase-1B; Torsin family 1 member B

来源：原核表达

宿主：E.coli

规格：10μg   50μg   200μg   1mg   5mg

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)具体详见说明书

片段与标签：Asn98~Lys327 (Accession # O14657) with N-terminal His Tag

物种来源（人、小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猕猴、山羊、绵羊、马、牛、猪、鸡、狗等其他物种多物种）相同的名称，不同的物种。

性状：冻干粉

表达系统：    大肠杆菌

产品纯度：>95%-98%（SDS-PAGE & RP-HPLC）

保存条件：如果样品在2-4周内使用，可以在4°C低温储存。 

TOR1B蛋白；耐扭蛋白1B(TOR1B)重组蛋白长期储存，建议添加载体蛋白（0.1％HSA或BSA），并储存在-20~ -80°C。避免多次冻融。

影响蛋白原核表达的因素很多，如蛋白的亲水性、密码子的稀有性、蛋白毒性等。如疏水性过强，就难以表达；稀有密码子过多或多个稀有密码子连在一起也难以表达。我以前也遇到过这种情况，首先要分析你的蛋白序列和二级结构，看看是否存在这些影响因素。如果必须要表达全长蛋白，像你这种情况难度就比较大，可以进行密码子的改造，或者更换载体，或者更换宿主菌。看你试验的目的，如果不需要表达全长蛋白，如表达部分抗原性强的片段，可以简单一点，表达部分片段即可。

TOR1B蛋白；耐扭蛋白1B(TOR1B)重组蛋白原核表达秘笈：表达前的分析比什么都重要：

表达不同于其它一些实验，比如：提取质粒、PCR、电镜切片，这些人为控制的因素比较多，出问题相对来说也比较好分析。表达呢，你把质粒克隆好啦，交给细胞，然后有些事情就不全是你要怎样就怎样了。原核表达在表达当中来说还是比较简单，细菌培养条件简单、生长速度快，需要的仪器和培养基都比较便宜。当然，它也存在一些缺乏高级修饰、细胞内部还原性过高等缺点。

原核表达从一开始的设计就非常重要，所谓好的开始是成功的一半。做足准备功夫，可是省去很多将来后悔的事情。首先，我们要根据是否要求可溶将载体分成两大类，如果希望可以同时尝试多种表达系统，也有许多商业化的系统供选择。

前面已经介绍过许多公司的商业化载体、菌株和多系统表达体系，现在我想先从自己的蛋白分析讲起。同样的载体、同样的系统，很可能表达这个蛋白表达量奇高，但是另外一个就是做不出来，所以没有全能的载体，只有永恒的分析。当然如果你的蛋白曾经在原核系统中成功表达出来那是好的，TOR1B蛋白；耐扭蛋白1B(TOR1B)重组蛋白选择同样的载体表达成功率会高很多。如果没有也好尝试找一些曾经表达过和你的蛋白拥有相类似结构的文献。比如大部分含有哺乳动物src同源的SH2蛋白相互作用域的蛋白都是用pGEX系列载体表达出来的。根据经验而言，含有较少半胱氨酸和脯氨酸的、平均大小为60kD的单体蛋白较容易表达。