人副流感病毒4B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

报价:¥4998
供货周期: 现货
品牌: LMAI Bio
型号: 50次
货号: LM18-88042
上海联迈生物工程有限公司
银牌会员7年生产商
关注展位 全部试剂
产品详情

1.png

人副流感病毒4B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒PCR在分子克隆和DNA分析中有多种用途,下面就向大家介绍PCR实验方法步骤:

方法

1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix 2mM             

4 μl     引物110pM                 

2 μl     引物210pM                 

2 μl     Taq 2U/μl               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl  

1 μl      ddH2O 50 μl  

PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。

2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93 40s 58 30s 72 60s,循环30-35次,在72 保温7min

3人副流感病毒4B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

PCR实验步骤

典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是:

将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93-94℃)使其变性解成单链;

  人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;

  耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。

实验过程:

一、人副流感病毒4B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒试剂准备

1. DNA模板

2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)

310×PCR Buffer

42mM dNTPmix:含dATPdCTPdGTPdTTP2mM

5Taq

二、操作步骤 

1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

      10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

       引物110pM               2μl

       引物210PM              2μl

       Taq酶(2U/μl            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

      ddH2O               50 μl

    PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。

2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93 40s  58 30s  72 60s,循环30-35次,zui后在72 保温7min

3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。

4PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

三、人副流感病毒4B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒注意事项

1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。

2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。

3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。

4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。

5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。

6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。

7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。

相关PCR产品列表:

14-73800 Hamster Leukemia Virus金黄地鼠白血病病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次

14-13300 Hantanvirus(HTV)汉坦病毒RT-PCR通用试剂盒 50次

14-33410 Hantavirus 1(HV)汉坦病毒1型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次

14-33420 Hantavirus 2(HV)汉坦病2型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次

14-33400 Hantavirus(HV)汉坦病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次

14-13100 Hanzalova Virus 汉扎洛瓦病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次

14-43410 Haplosporidium costale沿岸单孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-43420 Haplosporidium nelsoni尼氏单孢子虫染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-43400 Haplosporidium spp.单孢子虫通用染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-47000 Hart Park Virus哈特帕克病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次

14-47100 Hazara Virus哈扎拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次

14-37900 Helicobacter pylori幽门螺旋杆菌(染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-90100 Hemorrhagic Fever with Renal Syndrome Virus(HFRSV)肾综合症出血热病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次

14-70900 Hendra Virus亨德拉病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次

14-15700 Hepatitis A Virus(HAV)甲型肝炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次

14-37010 Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒A型染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-37020 Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒B型染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-10000 Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒cccDNA 染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-37030 Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒C型染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-37040 Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒D型染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-37050 Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒E型染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-37060 Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒F型染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-37070 Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒G型染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-37000 Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒H型染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-37080 Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒通用型染料法荧光定量PCR试剂盒 50次

14-53010 Hepatitis C Virus(HCV)丙型肝炎病毒1型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 50次



相关试剂 更多
同类推荐 更多
人副流感病毒4B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒由上海联迈生物工程有限公司为您提供,货号LM18-88042,规格:50次,CAS号:,如您想了解更多关于人副流感病毒4B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒价格、人副流感病毒4B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒结构式、批发、用途等信息,欢迎咨询。除供应人副流感病毒4B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒外,还可为您提供腺病毒B型PCR试剂盒、腺病毒C型PCR试剂盒等试剂,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴,LMAI-BIO客户服务电话400-860-5168转4246,售前、售后均可联系。
Business information
工商信息 信息已认证
contact us
联系方式

详细地址

上海市松江区新车公路185号上海莘莘学子创业园

联系电话

400-860-5168,4246
当前位置: LMAI-BIO 试剂 人副流感病毒4B型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

关注

拨打电话

留言咨询