pMXs-IRES-Puro 载体

pMXs-IRES-Puro 载体

pMXs-IRES-Puro 载体原理机制

载体效应实验 用牛血清白蛋白耦联二硝基苯 (BSA-DNP) 和卵白蛋白耦联二硝基苯 (OA-DNP) 制备载体—半抗原，观察载体在抗体产生中的作用。首先以 BSA － DNP 对小鼠进行初次免疫，然后分别用 BSA － DNP 和 OA － DNP 进行再次免疫，观察载体对抗 DNP 抗体产生的影响。结果发现，只有当初次和再次免疫时，半抗原耦联在相同的载体上才能产生抗半抗原抗体的再次应答。此作用被称为载体效应。载体效应实验证明了载体不是单纯起运载半抗原的作用，而是具有载体特异性。因此揭示了一个完全抗原分子，必须具有pMXs-IRES-Puro 载体决定基和半抗原决定基。并进一步证明了在抗体形成过程中存在有对载体特异性反应细胞，即 T 淋巴细胞为载体的反应细胞，对抗体产生起辅助作用；也存在对半抗原特异性反应细胞，即 B 淋巴细胞。

实验组 初次免疫 再次免疫 抗DNP抗体

1 BSA-DNP BSA-DNP +++

2 BSA-DNP OA-DNP +

3 BSA-DNP+OA OA-DNP +++

抗体的特异性来自于B细胞膜表面Ig受体对抗原的特异性识别，以致B细胞只能和其特异性识别的抗原结合并进行加工处理。但是作为T细胞依赖性抗原（Td-Ag），被B细胞或巨噬细胞加工后，只剩下一些MHC-Ⅱ类分子结合的抗原寡肽段被呈递给Th细胞，以产生反馈性的活化该特异性B细胞克隆的信号，并使B细胞分化成抗体分泌细胞。 [1]

在一个完整的大抗原分子上与Ab结合的表位和与MHC-TCR结合的序列可能不同，与抗体结合的表位相当于半抗原部分与MHC-TCR结合序列相当于半抗原载体部分。从而显示出在Td-Ag中半抗原与载体效应发生的分子基础。

同样的半抗原与不同的载体偶联结合都可以产生相应Ab，但其辅助T细胞可以不用。特异性的抗体产生后，可引起一系列的免疫效应。

在免疫应答中，B细胞识别半抗原，并提呈载体表位给CD4阳性T细胞；Th细胞识别载体表位。故通过载体把特异的T-B细胞之间连接起来，T细胞才能激活B细胞，使B细胞分泌抗体。这就是载体效应。