产品详情
PreScript One-Step RT-PCR Kit
产品概述
PreScript One-Step RT-PCR Kit采用了一步（One Step）RT-PCR 法。RNA→cDNA→PCR一管式反应，中途不需开盖添加任何试剂，降低污染风险。反转录反应使用了英赞特别开发的新型反转录酶PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase。该反转录酶对具有复杂二级结构的 RNA 模板也具有很强的延伸能力；PCR 反应使用了扩增性能优越的Hot Start型DNA聚合酶C-SsoRobust Taq DNA Polymerase，大大提高了本试剂盒的扩增性能和反应特异性。
在本试剂盒中，已将PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase、C-SsoRobust Taq DNA Polymerase、RNase Inhibitor 以及 One Step RT-PCR 用稳定剂等配制成了预混型的Prescript One-Step Enzyme Mix；同时把反应用Buffer、dNTP以及Enhancer Solution配制成了预混型的2× One-Step RT-PCR Buffer的形式，简化了反应液配制过程。反转录温度可以设定为50℃，能够有效抑制非特异性扩增，可对RNA进行高效的RT-PCR扩增。
产品内容| 组分 | LM035A | LM035B |
| Prescript One-Step Enzyme Mix | 100 μL | 400 μL |
| 2× One-Step RT-PCR Buffer | 625 μL× 2 | 1.25 mL× 2 |
| Control F-1 Primer(20 μM) | 20 μL | 80 μL |
| Control R-1 Primer(20 μM) | 20 μL | 80 μL |
| Positive Control RNA | 20 μL | 80 μL |
| RNase Free ddH2O | 625 μL× 2 | 1.25 mL× 2 |
产品优势
扩增能力强：该试剂盒扩增长至3 kb基因片段，产物可用于TA克隆
检测灵敏度高：可检测低至10 pg的Total RNA，满足RNA检测的需求
操作简便：一管式反应，大程度减少移液次数，避免操作失误 及交叉污染
实验案例
1. 扩增能力及灵敏度
以Hela细胞来源的20 ng Total RNA为模板，扩增片段长度为0.5 kb~3.0 kb的基因片段，结果表明，本产品可轻松扩至3 kb，且无明显非特异产生。
将人293T细胞来源的100 ng Total RNA进行10倍梯度稀释，共5个梯度（100 ng~10 pg），扩增基因为GAPDH，片段长度为0.8 kb的基因片段，实验结果表明，PreScript One-Step RT-PCR Kit检测限低至10 pg。
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