产品详情
First Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA Clearer)
产品概述
本产品基于PreScript II Reverse Transcriptase,包含合成高质量一链cDNA所需的所有成分,适用于后续的PCR、 qPCR以及PCR克隆。4× gDNA clearer可彻底去除残留的基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠。10× RT Reaction Mix包含优化的缓冲体系、dNTPs和gDNA clearer终止成分,保证cDNA的完整性,同时可根据需要,选择Oligo (dT)23VN、Random hexamers或基因特异引物作为逆转录引物。PreScript Ⅱ Reverse Transcriptase是通过定点突变得到RNase H活性缺失的M-MLV突变体。与常见的通过删除RNase H结构域方法得到的突变体相比, 本产品保留了完整的蛋白结构, 因此具有与野生型相同的聚合酶活性, 可用于较长的cDNA合成以及全长cDNA 文库的构建等。
产品内容 组分 | LM412A | LM412B |
4× gDNA clearer | 200 μL | 400 μL |
10× RT Reaction Mix | 100 μL | 200 μL |
PreScript Ⅱ Enzyme Mix | 100 μL | 200 μL |
Oligo (dT )23VN(50 μM) | 50 μL | 100 μL |
Random hexamers(50 ng/μL) | 50 μL | 100 μL |
RNase-free ddH2O | 1 mL | 1 mL |
产品优势
优异的cDNA合成效率:高效率的PreScript II Reverse Transcriptase,性能增强的同时具有野生型相同的聚合酶活性,能打开RNA 复杂二级结构,更高效的合成cDNA
模板兼容性高:兼容不同物种及完整度较差的Total RNA模板
应用范围广:可用于使用Random Primer、Oligo dT Primer以及Specific Primer的各种逆转录情况
基因组清洁效率高:4× gDNA clearer彻底去除残留的基因组DNA污染,确保后续结果更加可靠
实验案例
1. 基因组清除效率的检测
分别投入500 ng、50 ng、5 ng HeLa细胞gDNA 使用R412产品和A公司同类产品中基因组去除模块做清除效率检测,结果显示,R412产品中的4× gDNA wiper 可清除高达500 ng 的基因组残留,并且清除效率达到99% 以上。
2. 与其他公司同类型产品基因组DNA清除能力的比较
在HeLa 细胞total RNA中添加过量的人基因组DNA,与其他公司同类型试剂盒进行基因组DNA去除能力的比较模拟实验。结果显示,R412去除基因组DNA效果更为明显。
应用范围
高质量一链 cDNA的合成,适用于PCR、qPCR以及PCR克隆;用于较长的cDNA合成以及全长cDNA 文库的构建等。
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