产品详情
Robust First Strand cDNA Synthesis Kit
产品概述
本产品基于PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase,包含合成高质量一链cDNA所需的所有成分,适合于后续的PCR、qPCR以及PCR克隆。5× RT Reaction Mix包含优化的缓冲体系和dNTPs;PreScript Ⅲ Enzyme Mix包含PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase和RNase inhibitor。同时可根据需要,选择Oligo (dT)23VN、Random hexamers或基因特异引物作为逆转录引物。PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase是通过定点突变得到的RNase H活性缺失的全新逆转录酶,该酶的热稳定性和cDNA合成效率得到大幅提升,适用于具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。
产品内容 组分 | LM413A | LM413B |
5× RT Reaction Mix | 200 μL | 400 μL |
PreScript Ⅲ Enzyme Mix | 100 μL | 200 μL |
Oligo (dT )23VN(50 μM) | 50 μL | 100 μL |
Random hexamers(50 ng/μL) | 50 μL | 100 μL |
RNase-free ddH2O | 1 mL | 1 mL |
产品优势
高度热稳定性和cDNA合成效率:PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase具有极高的热稳定性和cDNA合成效率,适用于具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录
模板兼容性广:兼容不同物种及完整度较差的Total RNA
应用范围广:可用于使用Random Primer、Oligo dT Primer以及Specific Primer的各种逆转录情况
实验案例
1. 不同长度RNA模板的逆转录能力
以1 μg HeLa细胞Total RNA为模板,Oligo(dT) 23 VN为引物按照说明书体系和程序进行逆转录,取1 μL cDNA产物模板,用PfuMax HiFi DNA Polymerase进行扩增,可见R413产品可完整逆转录长达15 kb的RNA模板。
2. 与同类产品逆转录效率的比较
以1 μg HeLa细胞RNA为模板,使用R413产品和市售其他公司同类产品,按照各自说明书推荐体系和程序进行逆转录反应。以逆转录得到cDNA为模板,挑选高表达量和较低表达量两种基因,进行Realtime PCR检测这两种基因,结果显示(左图为高表达量基因检测结果,右图为较低表达量基因检测结果),R413产品的逆转录效率优于其他公司同类产品。
应用范围
高质量一链 cDNA的合成,复杂RNA模板的逆转录, PCR、qPCR以及PCR克隆;用于较长的cDNA合成以及全长cDNA 文库的构建等。
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