产品详情
Robust First Strand cDNA Synthesis Kit(+gDNA Clearer)
产品概述
本产品基于PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase,包含合成高质量一链cDNA所需的所有成分,适合于后续的PCR、qPCR以及PCR克隆。4× gDNA clearer可彻底去除残留的基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠。10× RT Reaction Mix包含优化的缓冲体系、dNTPs和gDNA clearer终止成分,保证cDNA的完整性。 PreScript Ⅲ Enzyme Mix包含PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase和RNase Inhibitor。同时可根据需要,选择Oligo (dT)23VN、Random hexamers或基因特异引物作为逆转录引物。改造后的PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase热稳定性和cDNA合成效率大幅提升,适用于具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。
产品内容 组分 | LM414A | LM414B |
4× gDNA clearer | 200 μL | 400 μL |
10× RT Reaction Mix | 100 μL | 200 μL |
PreScript Ⅲ Enzyme Mix | 100 μL | 200 μL |
Oligo (dT )23VN(50 μM) | 50 μL | 100 μL |
Random hexamers(50 ng/μL) | 50 μL | 100 μL |
RNase-free ddH2O | 1 mL | 1 mL |
产品优势
高度的热稳定性和cDNA合成效率:PreScript Ⅲ Reverse Transcriptase具有极高的热稳定性和cDNA合成效率,适用于具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录
不同模板兼容性高:兼容不同物种及完整度较差的Total RNA
应用范围广:可用于使用Random Primer、Oligo dT Primer以及Specific Primer的各种逆转录情况
基因组清洁效率高:4× gDNA clearer可彻底去除残留的基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠
实验案例
1. 基因组清除效率的检测
分别投入500 ng、50 ng、5 ng HeLa细胞gDNA 使用R412产品和A公司同类产品中基因组去除模块做清除效率检测,结果显示,R414产品中的4× gDNA wiper 可清除高达500 ng 的基因组残留,并且清除效率达到99% 以上。
2. 与同类产品逆转录效率的比较
以1 μg HeLa细胞RNA为模板,使用R414产品和市售其他公司同类产品,按照各自说明书推荐体系和程序进行逆转录反应。以逆转录得到cDNA为模板,挑选高表达量和较低表达量两种基因,进行Realtime PCR检测这两种基因,结果显示(左图为高表达量基因检测结果,右图为较低表达量基因检测结果),R414产品的逆转录效率优于其他公司同类产品。
应用范围
高质量一链 cDNA的合成,复杂RNA模板的逆转录, PCR、qPCR以及PCR克隆;用于较长的cDNA合成以及全长cDNA 文库的构建等。
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