T7 RNA Polymerase

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品牌: LMAI Bio
规格: 5KU
货号: LM3601A
CAS号:
上海联迈生物工程有限公司
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产品详情

T7 RNA Polymerase

T7 RNA Polymerase对T7噬菌体启动子具有高度的特异性,并可以其作为启动子,DNA作为模板体外合成正义链或反义链RNA。双链线性平末端或5’突出末端DNA均可作为T7 RNA Polymerase的底物模板,因此线性质粒、PCR产物均可用作体外合成RNA的模板。 正义或反义RNA链取决于模板DNA序列与T7启动子的位置,DNA位于T7启动子的下游,T7 RNA聚合酶会转录出正义RNA,反之则为反义RNA链。该酶来自重组 E.coli BL21菌株纯化而得,无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。
包装
组分名称数量T7 RNA Polymerase (50 U/μl)100 μl/500 μl5X T7 Transcription Buffer1 ml×2/1 ml×10

单位定义

在标准反应体系下,37℃ 1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量定义为一个活性单位。

应用

  • 制备放射标记的 RNA 探针

  • 合成用于体外翻译的 RNA

  • 合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA

  • 合成 RNA 反义链,调控基因表达

1X T7 Transcription Buffer

40 mM Tris (pH 7.8), 20 mM NaCl, 6 mM MgCl2, 2 mM Spermidine HCl, 10 mM DTT

酶储存液

10 mM Tris-HCl, 0.1 M NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, 0.01% (w/v) Triton X-100 , pH 7.5。

储存

-20°C可保存2年,避免反复冻融。

热失活

70°C,10min。

注意事项

1.质粒DNA的质量影响RNA的量和完整性。质粒DNA的浓度越高,生成RNA的质量越高。质粒模板DNA应该无RNase、蛋白、盐、EDTA、RNA污染, A260/280 值在1.8-2.0。
2.该酶对高浓度NaCl或KCl不耐受,当其浓度高于 150mM时,其活性受到显著抑制(~50%)。


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