牛痘病毒-拓扑异构酶（Topoisomerase I ）|500U|LM5013A-上海联迈生物工程有限公司

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牛痘病毒-拓扑异构酶（Topoisomerase I ）

该Topoisomerase I 来源于牛痘病毒（vaccinia virus），通过基因重组方案制备纯化。其能解旋DNA的超螺旋结构，除此外其能识别并切割双链DNA末端 [5’C(T)CCTT↓]，并且与DNA形成共价连接形成稳定复合物。该共价复合物遇到DNA的5’-OH基团后，重新连接形成完整DNA链。因此，使用Topoisomerase I 酶可作为DNA的连接有效工具。其可用于DNA的载体连接、缺刻修复、接头连接等实验。
组分
组分名称数量vaccinia Topoisomerase I (20 U/μl)25 μl/250 μl10×vaccinia TOPOI Buffer1 ml
应用
DNA-载体连接缺刻修复接头连接
活性定义
1单位指在37℃条件下，1h内使1μg超螺旋pUC19 DNA解旋所需要的酶量。
储存
-20℃可保存3年。
使用注意事项
（1）1×vaccinia TOPOI Buffer：50mM Tris-acetate (pH 7.5), 100mM NaCl, 2.5mM MgCl₂。（2）该酶的佳反应温度为37℃。80℃ 20min可使该酶失活。（3）该酶切割偶联试验时，识别位点[5’C(T)CCTT↓]的3’端碱基数量影响偶联效率。（4）共价复合物进行DNA分子连接时，底物5’-端需要保留-OH基团。

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