微生物检测培养基的样品采集、灭菌及使用

施启乐（广州）仪器有限公司

2022/10/09 11:07

培养基的灭菌及使用

1.每次配制时，要注意其生产日期是否在保质期内，查看其开瓶日期及瓶口密封性，保证其未变质，并且未吸潮。
2.培养基配制时，称量要准确，包括盐水的分装要准确。
3.一定要保证现配制现灭菌，未灭菌的配好培养基不能长时间放置，更不可隔夜。4.灭菌时要保证恒温、恒压，同时要保证有效的灭菌时间。
5.灭菌过的培养基要冰箱保存，可保存一周，一般不超过 3 天。而且要遵循“先入先出”原则，先配制的要先使用。
6.在使用时，要根据当班次的使用量，用水浴锅先将培养基溶化为液态，然后及时调低水浴温度（先化好的可从水浴取出，放在水浴锅锅盖上）待用，千万不可长时间使培养基处于高温状态。

7.做产品微生物检测时，倾倒培养基温度在 45℃左右，不可过烫，避免将菌烫死；也不可过凉，化好的培养基又结块凝固，不便于观察结果。
8.每瓶培养基均要做空白。
9.尽量集中做样，避免频繁打开同一瓶培养基瓶塞，增大培养基的污染几率，出现误差结果。
10.培养基剩余过少时，可先将其倾倒成空白用板。

检测环境的维持

1、大环境（检测室）（1）检测时，窗户和空调要关闭，或用酒精对房间进行喷雾消毒，避免房间内空气流通影响超净台内部环境（最好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间进行操作）。
（2）如果在原来的原料微生物检测室进行检测，要定期开启紫外灯，对房间进行杀菌。
2、小环境（超净工作台）1.定期清洁初效过滤器，要及时更换。
2.检测前，将超净台内部进行清洁，用 75%酒精进行擦拭消毒，并提前半小时将超净台紫外灯打开，对超净台内部环境进行杀菌。
3.关紫外灯，开风机，调整合适进风量，风量不可过低。
4.每次检测后，要对超净台内部进行清理、清洁，并用 75%酒精进行擦拭消毒。
5.紫外灯根据其使用寿命要及时更换。
6.检测同时，要做上相应菌落检测的环境空白。

7.检测区域的选择：a、一般在距离超净台外沿的 1/3-2/3 区域进行无菌操作；b、要在酒精灯火焰的外焰保护区域进行操作。

工器具的洁净度

1.玻璃器皿：采用干热灭菌方式进行灭菌。
2.检测用剪刀、勺子等物品要做到检测专用，不可与其它操作器具混用，使用时，先用75%酒精消毒，再采用灼烧方式进行灭菌。
3.接种针（环）采用灼烧方式进行灭菌，但要注意检测时要先将接种针（环）进行冷却。

样品的采集及检测

1、保证采样器具的无菌性

（1）玻璃器皿：采用干热灭菌方式进行灭菌，保证恒温、时间足够（但不可时间过长，容易导致玻璃器皿易裂纹而报废）。
（2）取样筐：使用前要用75%酒精进行喷洒消毒。
（3）取样勺：要保证其清洁消毒，清洁后用75%酒精进行擦拭消毒。
（4）取样袋：可先用酒精进行擦拭消毒，再在超净台用紫外灯照射消毒，（包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒）。
（5）电子称表面用 75%酒精消毒。