鲍氏不动杆菌PCR 检测试剂盒使用说明书

2020-04-24 15:48  下载量:0

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鲍氏不动杆菌PCR 检测试剂盒说明书 4.操作方法 4.1.1样本的处理(在样本制备区进行): 4.1.1.1取 n 个灭菌的 1.5 mL Eppendorf 管,其中 n 为被检样品与阴性对照的和(阳性对照、阴性对照在试剂盒中已标出),做标记。(注:试剂盒中的阳性对照直接作为 PCR 检测的模板,无需提取核酸) 4.1.1.2每管加入 600 ?L 裂解液,分别加入被检样本和阴性对照各 200 ?L,一份样本换用一个吸头,再加入 200 ?L 氯仿,混匀器上振荡混匀 5 s(不能过于强烈,以免产生乳化层,也可以用手颠倒混匀),于 4℃ 12 000 r/min 离心 15 min。 4.1.1.3取与 4.1.1.1 相同数量灭菌的 1.5 mL Eppendorf 管,加入 500 ?L 异丙醇(-20℃预冷), 做标记。吸取 4.1.1.2 各管中的上清液转移至相应的管中,上清液应至少吸取 500?L,不能吸出中间层,颠倒混匀。 4.1.1.4于 4 ℃、12 000 r/min 离心 15 min(Eppendorf 管开口保持朝离心机转轴方向放置),小心倒去上清,倒置于吸水纸上,沾干液体(不同样品须在吸水纸不同地方沾干);加入 600 ?L 75% 乙醇,颠倒洗涤。 4.1.1.5于 4 ℃、12 000 r/min 离心 10 min(Eppendorf 管开口保持朝离心机转轴方向放置),小心倒去上清,倒置于吸水纸上,尽量沾干液体(不同样品须在吸水纸不同地方沾干)。 4.1.1.64 000 r/min 离心 10s(Eppendorf 管开口保持朝离心机转轴方向放置),将管壁上的残余液体甩到管底部,小心倒去上清,用微量加样器将其吸

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