锦鲤疱疹病毒(KHV)荧光 PCR 检测试剂盒说明书

2020-05-15 16:01  下载量:0

资料摘要

资料下载

操作方法 样本的处理(在样本制备区进行): 取 n 个灭菌的 1.5 mL Eppendorf 管,其中 n 为被检样品与阴性对照的和(阳性对照、阴性对照在试剂盒中已标出),做标记。(注:试剂盒中的阳性对照直接作为 PCR 检测的模板,无需提取核酸) 每管加入 600 ?L 裂解液,分别加入被检样本和阴性对照各 200 ?L,一份样本换用一个吸头,再加入 200 ?L 氯仿,混匀器上振荡混匀 5 s(不能过于强烈,以免产生乳化层,也可以用手颠倒混匀),于 4℃ 12 000 r/min 离心 15 min。 取与 4.1.1.1 相同数量灭菌的 1.5 mL Eppendorf 管,加入 500 ?L 异丙醇(-20℃预冷), 做标记。吸取 4.1.1.2 各管中的上清液转移至相应的管中,上清液应至少吸取 500?L,不能吸出中间层,颠倒混匀。 于 4 ℃、12 000 r/min 离心 15 min(Eppendorf 管开口保持朝离心机转轴方向放置),小心倒去上清,倒置于吸水纸上,沾干液体(不同样品须在吸水纸不同地方沾干);加入 600 ?L 75% 乙醇,颠倒洗涤。 于 4 ℃、12 000 r/min 离心 10 min(Eppendorf 管开口保持朝离心机转轴方向放置),小心倒去上清,倒置于吸水纸上,尽量沾干液体(不同样品须在吸水纸不同地方沾干)。 4 000 r/min 离心 10s(Eppendorf 管开口保持朝离心机转轴方向放置),将管壁上的残余液体甩到管底部,小心倒去上清,用微量加样器将其吸干,一份样本换用一个吸头,吸头不要碰到有沉淀一面,室温干燥 3 min,不能过于干燥,以免 RNA 不溶。 加入 11 ?L DEPC 水,轻轻混匀,溶解管壁上的 RNA,2 000 r/min 离心 5 s,冰上保存备用。注:提取的 RNA 须在 2 h 内进行 PCR 扩

资料下载

文献贡献者

相关资料 更多

相关产品

当前位置: 上海莼试生 资料 锦鲤疱疹病毒(KHV)荧光 PCR 检测试剂盒说明书

关注

拨打电话

留言咨询