Cytek®全光谱流式技术及产品自发布以来，因其超多色的检测能力和卓越的灵敏度等特性，深受广大流式用户的肯定与支持，并逐步掀起了业内各厂家布局全光谱流式赛道的热潮。随着全光谱流式的逐渐普及，越来越多的用户开启了高参数流式之旅，而产出高质量的多色流式数据，也变成了更为广泛的需求……如果说追求颜色数量与数据质量的平衡是一场精彩的艺术演绎，那么，拥有一台值得信赖的全光谱流式细胞仪只是开始，强大的技术服务与支持将是最佳助力。
来自Cytek公司的首席科学家Maria C. Jaimes，是非常严谨的流式技术专家，对流式数据的质量有着很高的追求，
她也是Cytek两篇里程碑级文章（40色和45色）的作者之一，拥有丰富的全光谱流式多色方案设计与优化实战经验，
可以说是当下最具经验的全光谱流式技术专家之一。前不久，Maria在线上给大家分享了有关全光谱流式颜色数量和
高参数流式方案追求低的荧光溢漏扩散和高的数据分辨率，从而得以呈现高质量的数据结果。而这一目标的实现，是仪器光学系统的最优设计、检测器性能、仪器设置、方案设计和优化等诸多因素相辅相成的结果。
作为实验人员，如何搭建高质量的多参数方案呢？OMIP-069就是值得参考的指南性的文章，建议全光谱流式的使用人员阅读这篇文章的补充材料，详实的材料一步步地描述了方案设计和优化的思路和技巧。OMIP-069是Cytek研发与技术团队的经典佳作，也体现了Cytek在全光谱流式领域强大的技术力量。
当检测颜色不多时，例如只有2个颜色，实验普遍都能得到清晰分群的结果。当方案升级到40色甚至超过40色时，是否意味着此时就需要牺牲数据的分辨率呢？答案当然是否定的，而接下来分享的45色方案，生动地阐释了颜色数量和数据质量的平衡艺术。
45色方案的设计起点基于40色经典方案，第一步考虑到部分试剂的可用性及数据表现的可优化性，对原方案的部分试剂进行了替换。第二步扩展方案，在人单个核细胞的基础上，重点聚焦于记忆T细胞的免疫表型进行深入剖析。横向对比两个方案的数据表现，45色方案获得了相当甚至于更优的分辨率。
45色方案设计借助Cytek® Cloud云端配色工具，一站式集成了全光谱流式方案设计到数据采集的在线工具，Panel Builder内置预先设计的多色方案和OMIP已发表方案，用户可以一键检索并以此为基础进行修改，也可以自主DIY设计方案；Experiment Builder将多色方案无缝传递至SpectroFlo®软件，简化了上机流程。
全光谱流式捕获荧光素完整光谱特征，相较于传统流式，能够兼容发射光谱高度相似的荧光素。45色方案中作者测试了一系列相似的荧光组合对，均能被清晰地区分，FMO对照也进一步证明了相似染料并未对多色结果产生影响。
聚焦于记忆T细胞，细分出众多细胞亚群，这个方案的亮点之一在于颜色多，但是对于低比例细胞亚群依旧保持卓越的分辨率，不同分化状态的记忆T细胞的功能性指标表达图谱均得到了“高清”呈现。
Cytek® Aurora™ 分析系统和 Cytek® Aurora™ CS 分选系统搭载相同的全光谱分析（FSP™）技术，实验方案可在分析分选平台实现无缝衔接，两个系统的二维散点图和降维可视化分析结果均展现出45色深度免疫表型方案的高度可比性。
进一步，在Cytek® Aurora™ CS 分选仪上，实现了一管样本6路同时分选低比例细胞，并对分选后的细胞进行胞内细胞因子检测，证明了经过分选的6群记忆T细胞亚群的功能性维持正常。
综上，高质量数据应作为高维方案设计和优化的主要目标，Cytek® 40色和45色方案可以作为指南参考，Cytek® Cloud可以作为实验设计化繁为简的有利工具。Cytek® Aurora™分析系统和Cytek® Aurora™ CS分选系统无缝衔接，为流式高质量数据的呈现定义了新的金标准。
在聆听这场讲座之前，也欢迎大家点击阅读：
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Of Colors And Data Quality: Lessons Learned From Human Memory T Cells ，查看完整讲座视频。
或者访问原文章链接https://mp.weixin.qq.com/s/Ug15yH68mIObyAT7ZmYAeQ，以获取视频。
参考文献
1Park, L. M., Lannigan, J. & Jaimes, M. C. OMIP-069: Forty-Color Full Spectrum Flow Cytometry Panel for Deep Immunophenotyping of Major
Cell Subsets in Human Peripheral Blood. Cytometry. Part A : the journal of the International Society for Analytical Cytology 97, 1044-1051, doi:10.1002/cyto.a.24213 (2020).
2Bonilla, D. L., Park, L., Low, Q., Lannigan, J. & Jaimes, M. J. b. 45-Color Full Spectrum Flow Cytometry Panel for Deep Immunophenotyping of the Major Lineages Present in Human Peripheral Blood Mononuclear Cells with Emphasis on the T cell Memory Compartment. 2024.2004. 2027.591472 (2024).
关于Cytek
About Cytek /
Cytek Biosciences, Inc.（Nasdaq: CTKB）作为一家全球技术领先的生命科学技术公司，通过其受专利保护的全光谱分析（Full Spectrum Profiling™，FSP™）技术，提供高分辨率、高参数和高灵敏度的新一代细胞分析工具。Cytek的创新技术通过检测荧光信号的完整光谱信息，以实现更高水平更高灵敏度的多参数检测。Cytek的FSP™平台包括其核心仪器 ——Aurora™和Northern Lights™分析系统、Aurora™ CS分选系统，Amnis®和Guava®品牌下的流式细胞仪和成像产品，Cytek Orion™全自动试剂预混系统，以及试剂、软件和服务，为客户提供全面和完整的解决方案。Cytek总部位于美国加利福尼亚州Fremont，在全球设有分部和分销渠道。更多的相关信息，请登录Cytek的官方网站：www.cytekbio.com和www.cytekbio.com.cn。
注：Cytek的产品仅供科研使用，不可用于临床诊断（Cytek® Northern Lights-CLC系统，DxP Athena®系统以及部分试剂除外）。
Cytek, Tonbo Biosciences, cFluor, SpectroFlo, ESP, Full Spectrum Profiling, FSP, DxP Athena, Cytek Aurora, Northern Lights, Cytek Orion, Amnis, Guava 和 ImageStream 是Cytek Biosciences, Inc.的商标。
Cytek®全光谱检测技术相关专利包括但不限于：US10739245B2，US11169076B2，US10788411B2。
Guava®系列产品涉及的专利包括但不限于：US7320775B2，US7410809B2。
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